Доказательной базой для рекомендаций явились публикации, вошедшие в Кохрейновскую библиотеку, базы данных PubMed, EMBASE и MEDLINE, электронную библиотеку (www.e-library.ru). Глубина поиска составила 40 лет. Клинические рекомендации созданы на основе согласованного мнения членов Ассоциации специалистов и организаций лабораторной службы «Федерация лабораторной медицины», Российского общества акушеров-гинекологов, Российского общества неонатологов, а также обобщения опыта авторов, их отечественных и зарубежных коллег и апробированных рекомендаций, действующих в настоящее время в США [1], Канаде [2], Великобритании [3], Швеции [4].

Оценка уровня доказательности и значимости рекомендаций проводилась в соответствии с данными, изложенными далее.

Уровни доказательности рекомендаций приводятся при изложении текста далее.

Стрептококк группы В (СГВ, GBS, Streptococcus agalactiae) вызывает тяжело протекающие заболевания у новорожденных детей и представляет опасность для пациентов других возрастных групп.

Неонатальные инфекции, вызванные стрептококком группы В, остаются в центре внимания многих специалистов в области перинатальной медицины. Ранние СГВ-септицемии и пневмонии новорожденных отличаются тяжелым течением и высокой летальностью, что обратило на себя внимание еще в 70-е годы прошлого века, когда в развитых странах СГВ вытеснил грамотрицательные бактерии с первых позиций в этиологической структуре неонатальных инфекций. С тех пор прошли десятилетия, но ведущая роль СГВ в структуре бактериальных перинатальных инфекций остается незыблемой, несмотря на предпринимаемые лечебные и профилактические мероприятия. СГВ-инфекции новорожденных относятся к плохо управляемым инфекциям [5].

В подавляющем большинстве случаев новорожденные инфицируются СГВ во время родов от матери, причем чаще это происходит при вагинальном родоразрешении [1, 6]. Риск заболевания доношенного ребенка составляет 1—2% [1, 6, 7], недоношенного — 15—20%, а при сроке гестации менее 28 нед — практически 100% [8, 9]. СГВ вызывает ранние неонатальные инфекции, такие как сепсис, менингит, пневмония, остеомиелит, артрит и пиелонефрит, частота которых в разных странах колеблется от 0,2 до 5 и более на 1000 живорожденных детей [6, 10].

В акушерской практике со стрептококком группы В связывают бактериемию, инфекции мочевых путей, хориоамнионит, преждевременное излитие околоплодных вод, преждевременные роды, послеродовой эндометрит и др. [8, 11—18].

По данным ФГБУ «НЦАГиП им. В.И. Кулакова» Минздрава России, частота тяжелых СГВ-инфекций у новорожденных (сепсис, менингит, пневмония) с ранним началом за период с 1997 по 2013 г. имела отчетливую тенденцию к снижению. Показатель составлял в 1997 г. 3,53 на 1000 живорожденных, летальность — 60%. К 2006 г. заболеваемость снизилась до 0,46‰. С 2008 по 2013 г. отмечен подъем заболеваемости до 1,14—2,14‰. Сравнительно высокие показатели заболеваемости СГВ-инфекциями объясняются сосредоточением в центре значительной доли беременных высокого риска, большим числом преждевременных родов, а начиная с 2008 г. — выхаживанием детей, родившихся с очень низкой и экстремально низкой массой тела. Что касается частоты вагинального носительства, то выявление его в различных группах женщин варьировало от 8—10% у небеременных и до 13—25% у беременных с различной степенью риска инфекционной патологии, достигая наивысших показателей при невынашивании беременности [5].

На основании 4-летнего мониторинга в Городском клиническом перинатальном центре Омска выявлено носительство S. agalactiae у 6—8% пациенток различных категорий. Отмечается, что перинатальное инфицирование СГВ недоношенных новорожденных с низкой массой тела при рождении в 50% случаев приводит к клинической манифестации генерализованного инфекционного процесса, а инфицирование доношенных новорожденных — в половине случаев к развитию локальных гнойно-воспалительных процессов [19].

В ГБУ НИИОЗММ ДЗМ проведен ретроспективный анализ распространенности СГВ среди новорожденных пяти родильных домов Москвы. По результатам микробиологического исследования 4534 проб клинического материала от 2265 новорожденных групп высокого инфекционного риска развития СГВ в среднем выделен у 4,9%. В ряде родильных домов отмечен низкий уровень выявления СГВ вследствие отсутствия целенаправленной диагностики с применением хромогенных сред или ПЦР детекции S. agalactiae [20].

В США, Канаде и странах Европы приняты регламентированные Национальные программы профилактики и лечения СГВ-инфекций, обязательные для выполнения всеми медицинскими учреждениями [1—4]. В России отсутствуют официальная регистрация СГВ-инфекций и клинические рекомендации по их профилактике [5]. Действующие нормативные документы по оказанию медицинской помощи по профилю «Акушерство и гинекология» [21, 22] регламентируют проведение антибиотикопрофилактики в родах при выявлении стрептококка группы В, но не определяют алгоритм и методы диагностики колонизации и/или инфекции, вызванных СГВ. Отсутствие клинических и лабораторных стандартов диагностики СГВ-инфекции и ее регистрации у беременных и новорожденных не дает представлений о реальной значимости этой проблемы в нашей стране.

Внедрение современных методов лабораторной диагностики и программы профилактики СГВ-инфекций позволит добиться стойкого снижения заболеваемости среди новорожденных детей, беременных и родильниц.

Streptococcus agalactiae относится к бактериям рода Streptococcus и является единственным представителем стрептококков группы В по классификации Р. Лендсфилд. СГВ — грамположительные кокки, образующие цепочки вариабельной длины. По типу дыхания СГВ являются факультативными анаэробами. Типичные штаммы слабо лизируют in vitro эритроциты жвачных животных (гемолиз типа β), что стало основой для отнесения бактерии к β-гемолитической группе стрептококков. Однако 25—30% штаммов атипичны по данному признаку и проявляют α-гемолиз или не обладают выраженными гемолитическими свойствами.

СГВ образует два типа полисахаридных антигенов: группоспецифический, который является общим для всех штаммов, интегрированный в стенку бактерии, и капсульный. Выявление первого позволяет дифференцировать бактерию от стрептококков других групп, а по капсульным антигенам штаммы бактерии делят на 10 известных в настоящее время серотипов (Ia, Ib, II-IX). Дополнительными идентификационными маркерами разных вариантов СГВ служат поверхностные антигены α, β и Rib. С их помощью дифференцируют серотипы, имеющие одинаковый капсульный антиген (например, Ia и Ib). Серотипирование СГВ проводят иммунологическими методами (иммуноэлектрофорез, иммунопреципитация, иммунофлюоресценция, иммуноферментный анализ, коагглютинация, капиллярная преципитация, агглютинация, латекс-агглютинация). К сожалению, наборы для серотипирования СГВ в Российской Федерации недоступны, однако в последние годы отечественные производители интенсивно разрабатывают тест-системы ПЦР в режиме реального времени для определения серотипов и сиквенс-типов S. agalactiae. Из иммунологических методов в рутинной практике чаще используют метод латекс-агглютинации. Часть штаммов СГВ не удается серотипировать, что обусловлено наличием до настоящего времени неизвестных капсульных антигенов и механизмов, регулирующих их экспрессию. В эпидемиологических целях для типирования штаммов S. agalactiae применяют молекулярно-генетические методы (ПЦР, ПЦР с рассеянными затравками, риботипирование, IS-типирование, пульс-электрофорез и др.).

СГВ в организме человека могут колонизировать ротоглотку, анальную область прямой кишки, влагалище (чаще преддверие), урогенитальный тракт, кожу. Наличие у части штаммов СГВ дополнительных факторов вирулентности делает их инвазивными, способными вызывать сепсис, поражать разные ткани и органы (легкие, головной мозг, суставы и др.). Инвазивность штаммов и их адаптация к определенным возрастным группам людей коррелирует с их принадлежностью к ряду серо- и генотипов, определение которых предоставляет информацию для предварительной оценки клинической и эпидемиологической опасности [23—25].

Из числа экскреторных факторов наибольшее значение имеет β-гемолизин/цитолизин, вызывающий повреждение клеток, в том числе эритроцитов, и индуцирующий нарушения функционального состояния сердца и печени, способствующий проникновению бактерии через эпителиальные барьеры и развитию сепсиса, препятствующий фагоцитозу. Важен также CAMP-фактор: его патогенетическое значение не доказано, но он является дифференцирующим маркером культур S. agalactiae и S. pyogenes.

СГВ проявляет стабильную чувствительность к пенициллину и другим β-лактамным антибиотикам. В последние годы значительно возросла резистентность S. agalactiae к линкозамидам и макролидам (во многих странах частота выделения устойчивых к клиндамицину штаммов достигла 13—20%, а к эритромицину — 25—32%). Особенно часто устойчивыми к эритромицину оказываются штаммы, относящиеся к V серотипу. Многие из них проявляют устойчивость к обоим упомянутым антибиотикам [26]. Нередка устойчивость к тетрациклинам, причем в ряде случаев она сочетается с резистентностью к макролидам, линкозамидам и хлорамфениколу. До 2003 г. резистентность S. agalactiae к фторхинолонам не регистрировали. В последующий период в Японии и США выделили штаммы СГВ с высоким уровнем устойчивости к широкому спектру фторхинолонов. Обнаруженные в Японии штаммы, устойчивые к фторхинолонам, относились к серотипу Ib [26, 27].

S. agalactiae распространен повсеместно. Природный резервуар бактерии обширен и включает различные виды млекопитающих (человек, обезьяна, крупный рогатый скот, верблюд, лошадь, дельфин, собака, кошка, хомяк, мышь), птиц (курица) и холоднокровных животных (лягушка, рыба, ящерица). Инфекция может передаваться от животных человеку, но большинство выделяемых от людей штаммов бактерий циркулируют среди населения, минуя зоонозный резервуар. Различия между штаммами бактерий, выделяемыми от людей и сельскохозяйственных животных, достаточно велики, что указывает на наличие нескольких самостоятельных эковаров агента, патогенных для основных хозяев.

СГВ является комменсалом микробиоты кишечника человека. Колонизируя дистальную часть прямой кишки, СГВ периодически распространяются и на другие локусы (влагалище, урогенитальный тракт, кожу и пр.). У большей части инфицированных взрослых людей колонизация протекает бессимптомно в виде здорового носительства.

Установлено, что у 5—35% женщин СГВ можно обнаружить во влагалище и часто в уретре их половых партнеров [8, 16, 33, 46, 48, 72]. Показана достоверная связь носительства СГВ во влагалище не только с ранними септицемиями новорожденных, но и с самопроизвольными выкидышами, преждевременными родами, преждевременным излитием околоплодных вод, мочевой инфекцией у беременных, рождением детей с низкой массой тела, развитием хориоамнионита в родах, эндометритом и сепсисом у родильниц [28—30]. Однако связь акушерской патологии и СГВ-носительства оказалась далеко не прямолинейной. Носительство СГВ во влагалище не является постоянным и чаще всего носит интермиттирующий характер. Наиболее высок уровень колонизации у женщин репродуктивного возраста и беременных [31—33]. У беременных СГВ выделяют из перечисленных областей в 7—30% случаев (чаще у молодых, имеющих высокую половую активность или пользующихся внутриматочными средствами контрацепции). Из них 60—75% остаются СГВ-носителями до конца беременности. Обследование во время беременности не дает адекватного прогноза о возможности колонизации родовых путей во время родов. И хотя контаминация плода в родах происходит у каждой второй роженицы — носительницы СГВ, только у 2—5% инфицированных новорожденных развиваются тяжелые формы СГВ-инфекций с летальностью 20—70% [34] и высокими показателями при преждевременных родах. Тяжелые инфекции ассоциированы с длительными родами и ранним разрывом плодных оболочек. Чаще всего СГВ-сепсис регистрируют у новорожденных, рожденных от матерей с высокой степенью колонизации влагалища, тем не менее около 30% неонатального СГВ-сепсиса регистрируют при низких титрах СГВ в родовых путях [35]. Механизм заражения плода всегда связан с восходящим из влагалища инфицированием околоплодных вод, размножением и накоплением в них СГВ. Заражение плода происходит при заглатывании и аспирации инфицированных околоплодных вод. Однако возможно инфицирование плода через неповрежденные оболочки — интраканаликулярно [36, 37].

Эпидемиология поздней формы болезни детей мало изучена. Предполагают, что она возникает в результате передачи возбудителя как во время родов, так и в последующий период и в половине случаев связана с отсроченным началом развития заболевания при заражении от матери в родах либо с горизонтальным путем передачи от инфицированных медицинских работников в стационаре или взрослого во внебольничной среде [1, 15].

Мониторинг распространения серотипов СГВ на определенных территориях среди разных групп населения важен в прогностическом отношении и для правильной интерпретации результатов бактериологических исследований, а также для разработки вакцины с оптимальным антигенным составом для определенной популяции населения. В 80-е годы прошлого века в ФГБНУ «НИИ акушерства, гинекологии и репродуктологии им. Д.О. Отта» проведена работа по изучению циркуляции серотипов СГВ беременных женщин, новорожденных детей и медицинского персонала акушерского стационара Северо-Западного региона России. Среди обслуживающего персонала клиник преобладали штаммы Ia, III и III/R. У новорожденных чаще выделяли серотипы IIc, Iac, Ibc. Было выявлено 18 типовых комбинаций антигенов стрептококка [38]. В Московском регионе преобладали серотипы Iac и Ibc, зафиксировано 15 комбинаций типовых антигенов стрептококка [39]. Официальная статистика распространенности серотипов СГВ в Российской Федерации отсутствует.

В настоящее время в мире отсутствует вакцина против СГВ-инфекций, хотя интенсивно идут разработки в разных странах мира в этом перспективном направлении [40—45].

В зависимости от сроков манифестации различают две формы клинического проявления СГВ-инфекции у новорожденных: раннюю и позднюю. Однако их симптоматика неспецифична.

Ранняя форма СГВ-инфекций в 90% случаев проявляется в первые 12 ч после рождения ребенка. В подавляющем большинстве случаев ее проявлениями являются сепсис и/или пневмония, реже — гнойный менингит или менингоэнцефалит, чаще у недоношенных детей спорадически проявляются поражения других органов.

Выраженность клинических проявлений ранней формы СГВ-инфекции вариабельна. У недоношенных детей возможно молниеносное течение заболевания, сопровождающееся септическим шоком, респираторным дистресс-синдромом и летальным исходом, наступающим в течение нескольких часов.

Пневмония сопровождается дыхательной недостаточностью вплоть до персистирующей легочной гипертензии. Нарушения дыхания проявляются уже в первые часы после рождения ребенка.

Начальная стадия менингита нередко остается незамеченной из-за слабой выраженности и вариабельности клинических нарушений, ассоциированных с поражением центральной нервной системы.

Поздняя форма СГВ-инфекций новорожденных проявляется в период 2—12 нед жизни, реже — в возрасте до 6 мес. У 80—85% заболевших она проявляется менингитом, реже сепсисом, остеомиелитом и/или септическим артритом, спорадически этмоидитом, лимфаденитом, конъюнктивитом, эндокардитом, эпиглоттитом, эмпиемой, некротизирующим фасциитом и токсическим шоком.

У беременных женщин инфекция может сопровождаться воспалительными заболеваниями мочевых путей, хориоамнионитом, эндометритом, ассоциированной с кесаревым сечением раневой инфекцией.

По данным литературы, бактериурия, вызванная СГВ, обнаруживается в моче 2—7% беременных женщин и является маркером массивной колонизации родовых путей [46—50]. СГВ-бактериурия родильниц связана с повышенным риском ранних СГВ-инфекций у новорожденных [46—49] и поэтому является абсолютным показателем для антибиотикопрофилактики в родах даже при низких концентрациях возбудителя в моче (С III) [54, 55].

Факторы, сочетающиеся с инфицированием плода (новорожденного) [11, 56—65]:

— преждевременные роды (AII);

— повышение температуры тела у роженицы выше 38 °C (AII);

— безводный промежуток более 18 ч (критический период 24 ч);

— низкая масса тела, недоношенность (рост заболеваемости СГВ-инфекцией увеличивается в 7—15 раз);

— инфицированность плаценты и/или амниотической жидкости (хориоамнионит, внутриматочная инфекция).

Прогностические маркеры инфицирования плода (новорожденного) во время беременности (родов):

— анамнестические факторы риска: в анамнезе дети, рожденные с признаками заболевания, вызванного СГВ (AII) [66—69];

— СГВ в моче во время настоящей беременности (маркер высокого риска колонизации плода) (AIII) [31, 33, 46, 48, 65];

— интактные плодные оболочки и родоразрешение путем операции кесарева сечения не исключают инфицирования новорожденного (CIII) [70, 71].

Риск передачи СГВ новорожденному:

— при инфицировании матери составляет 42—72%;

— у 2/3 колонизированных новорожденных от матерей с выявленным СГВ развивается бессимптомное носительство [72];

— на каждые 100 инфицированных доношенных новорожденных приходится 1 случай тяжелой СГВ-инфекции, в сроки гестации 28—37 нед — 15—20% случаев на 100 новорожденных и при сроке менее 28 нед беременности достигает 100% [8];

— потенциальным источником СГВ-инфекции является не только мать ребенка, но и медицинский персонал (в 16—47% случаев) [72].

Осложнения, связанные с беременностью

Беременность, закончившаяся абортивным исходом

Родоразрешение

Осложнения послеродового периода

Послеродовой сепсис

Воспалительные болезни женских половых органов

Сепсис, дети

Другие инфекционные и паразитарные болезни, дети

Малая масса тела при рождении, недоношенность

Крайне малая масса тела при рождении, крайняя незрелость

Лечение новорожденных с тяжелой патологией с применением аппаратных методов поддержки или замещения витальных функций.

А40 — Стрептококковая септицемия

А40.1 — Септицемия, вызванная стрептококком группы B

А49.1 — Стрептококковая инфекция неуточненная

В95.1 — Стрептококки группы B как причина болезней, классифицированных в других рубриках

G00.2 — Стрептококковый менингит

J15.3 — Пневмония, вызванная стрептококком группы B

M86 — Остеомиелит

О42 — Преждевременный разрыв плодных оболочек

О42.0 — Преждевременный разрыв плодных оболочек, начало родов в последующие 24 ч

О42.1 — Преждевременный разрыв плодных оболочек, начало родов после 24-часового безводного периода

О42.2 — Преждевременный разрыв плодных оболочек, задержка родов, связанная с проводимой терапией

О42.9 — Преждевременный разрыв плодных оболочек, неуточненный

О60 — Преждевременные роды

О85 — Послеродовой сепсис

P36 — Бактериальный сепсис новорожденного

P36.0 — Сепсис новорожденного, обусловленный стрептококком группы B

P23.9 — Врожденная пневмония неуточненная

Р23.3 — Врожденная пневмония, вызванная стрептококком группы B

Уровень компетентности персонала, участвующего в проведении исследований, должен соответствовать действующему законодательству и быть подкреплен документально (дипломы, сертификаты, свидетельства и др.) в соответствие с действующей номенклатурой специальностей [73—75]:

— специалисты с высшем профессиональным образованием по одной из специальностей «Лечебное дело», «Педиатрия», «Медико-профилактическое дело», «Медицинская биохимия», «Медицинская биофизика», «Медицинская кибернетика», имеющие сертификат специалиста по специальности «Клиническая лабораторная диагностика» и «Бактериология»;

— специалисты с высшим профессиональным образованием по специальности «Биология», «Биохимия», «Биофизика», «Генетика», «Микробиология», «Фармация» и дополнительным профессиональным образованием в соответствии с направлением профессиональной деятельности «Клиническая лабораторная диагностика» или «Бактерио-логия»;

— специалисты со средним медицинским образованием и наличием сертификата по специальности «Лабораторная диагностика», «Лабораторное дело», «Бактериология».

Выполнение исследований по месту лечения (Point-of-care testing) по выявлению стрептококков группы В может быть выполнено клиническими специалистами с высшим и средним медицинским образованием согласно ГОСТ Р ИСО 22870—2009 [76].

Медицинский персонал, непосредственно участвующий в проведении исследования в лаборатории, обязан соблюдать требования по безопасности труда при работе с микроорганизмами III—IV группы патогенности. В лаборатории должны соблюдаться правила биологической безопасности, сбора и утилизации отходов, правила по охране труда [77—83].

Все сотрудники должны выполнять инструкции и правила техники безопасности, изложенные в технических паспортах к электрическим приборам, используемым в работе; персонал, работающий с реактивами, должен быть обучен обращению с ними, использовать средства персональной защиты, соблюдать правила личной гигиены.

Лабораторная служба медицинских организаций должна иметь санитарно-эпидемиологическое заключение для работы с микроорганизмами III—IV группы патогенности и медицинскую лицензию на выполнение работ по специальностям «Клиническая лабораторная диагностика», «Лабораторная диагностика», «Бактериология» и «Бактериология» на доврачебном этапе [79]. Организация помещений, требования к оборудованию и правила работы в лаборатории должны соответствовать действующим нормативно-правовым документам, регламентирующим деятельность клинико-диагностических и бактериологических лабораторий учреждений здравоохранения [77—80].

Сбор, временное хранение, обеззараживание и транспортировка потенциально опасных отходов, образующихся в процессе выполнения технологии, должна проводиться в соответствии с действующими санитарными правилами и нормами [83]. Отходы класса Б, потенциально содержащие микроорганизмы, подлежат обязательному обеззараживанию (дезинфекции)/обезвреживанию. Вывоз и обезвреживание отходов должны проводиться аккредитованной организацией.

Для проведения микробиологической диагностики инфекций, вызванных стрептококком группы В, лаборатории должны быть оснащены материально-техническими ресурсами согласно приложению 1.

Для выявления колонизации влагалища беременных стрептококком группы В проводится сбор вагинально-ректальных мазков. Во всех остальных случаях забирается биоматериал только при наличии клинических признаков инфекции.

Весь биологический материал, поступающий в лабораторию, должен быть правильно промаркирован и/или штрихкодирован. С пробами доставляются направления, в которых указывают фамилию, имя, отчество пациента, пол, возраст или дату рождения, № истории болезни/амбулаторной карты, срок беременности, наименование образца (вагинально-ректальный мазок, кровь, спинномозговая жидкость, моча и пр.), вид лабораторного исследования (посев, ПЦР-РТ, экспресс-тест на СГВ), предварительный клинический диагноз, применяемые антимикробные препараты, фамилия и инициалы назначившего исследование врача [1, 80, 84—86]. Сбор проб, хранение и транспортировка биоматериала определяется в каждом конкретном случае с учетом симптоматики заболевания в соответствии с и МУК 4.2.2039—05 [84] и ГОСТ Р 53079.4—2008 [85].

В плановом порядке с целью выявления колонизации беременных СГВ проводят сбор вагинально-ректальных мазков у беременных женщин из группы риска в соответствии с прогностическими маркерами инфицирования плода (новорожденного) во время беременности (AII) [1, 86]. Взятие образцов проводят в амбулаторно-поликлинических учреждениях, отделениях родовспомогательных стационаров или беременными женщинами самостоятельно, после предварительного информирования о порядке взятия в устной или письменной форме. Стерильный тампон вводят круговыми движениями по стенке влагалища, затем тот же тампон вводят в анальное отверстие на расстояние 1,5—2 см.

Пробу доставляют в лабораторию в кратчайшие сроки для выполнения исследования. При необходимости длительного хранения используют транспортные среды: стерильная пробирка с пластиковым аппликатором со средой Эймса (Amies), Стюарта (Stuart) или с селективным Lim-бульоном. При использовании транспортных сред Эймса и Стюарта сроки хранения составляют 24—48 ч при 2—8 °С. Для обогащения и накопления стрептококков группы В рекомендуется селективный Lim-бульон. Входящие в его состав антибиотики (колистин 10 мкг/мл и налидиксовая кислота 15 мкг/мл) подавляют рост сопутствующей бактериальной микрофлоры и создают селективные преимущества для роста S. agalacticae. Бульон может быть использован как для посева вагинально-ректального мазка, так и для селективного обогащения СГВ независимо от выбора метода выделения/детекции S. agalacticae (CII).

При подозрении на СГВ-инфекции различной локализации у беременных проводят сбор биологического материала для культурального и молекулярно-биологического исследования из соответствующих локусов (из предполагаемого очага инфекции) [1, 80, 84—86].

При взятии мочи для бактериологического или молекулярно-биологического исследования собирают среднюю порцию утренней свободно выпущенной мочи в количестве 5—10 мл в одноразовый стерильный контейнер [86, 87]. Образец мочи должен быть доставлен в лабораторию в течение 1—2 ч. При невозможности выполнить это требование допускают хранение пробы мочи при температуре 2—8 °С в течение 24 ч с момента взятия.

Взятие крови для посева производят из локтевой вены после двукратной обработки кожи локтевого сгиба стерильной салфеткой, смоченной кожным антисептиком или 70° этиловым спиртом. После обработки кожи вену пальпировать нельзя! Через 1—2 мин с соблюдением правил асептики забирают кровь в коммерческие флаконы для аэробного культивирования. Для ряда коммерческих флаконов, благодаря вакуумной аспирации крови, необходимый объем крови поступает во флакон автоматически через иглу-бабочку и переходник.

У женщин массой тела до 80 кг объем крови для исследования должен составлять 5—10 мл. Пробы крови берут как можно раньше от начала лихорадки, по возможности 2—3 пробы с интервалом 30—60 мин из периферических вен верхних конечностей (взятие крови на высоте лихорадки не повышает чувствительность метода, более важным для выявления этиологии заболевания становится оптимальный объем взятой крови и количество проб). Взятие одной пробы из периферической вены, а другой из катетера допустимо только в исключительных случаях: при необходимости выявить катетерассоциированную бактериемию или при объективных трудностях, связанных с проведением венепункции.

Новорожденным без клинических признаков инфекции, рожденным от матерей, не колонизированных СГВ, плановое обследование на носительство СГВ не показано. Новорожденным без клинических признаков инфекции из группы риска по СГВ-инфекции, рожденным от матерей — носителей СГВ (вагинально-ректальное носительство, СГВ-бактериурия) показано плановое обследование в течение первых суток жизни на предмет колонизации слизистых оболочек СГВ. Обследование проводят путем взятия на микробиологическое исследование мекония, мазков со слизистой оболочки ротоглотки и из ануса. Биологический материал берут стерильным тампоном и хранят в стерильной пластиковой пробирке.

Пробу доставляют в лабораторию в кратчайшие сроки для выполнения исследования. При необходимости длительного хранения используют транспортные среды: стерильная пробирка с пластиковым аппликатором со средой Эймса (Amies), Стюарта (Stuart) или с селективным Lim-бульоном. При использовании транспортных сред Эймса и Стюарта сроки хранения составляют 24—48 ч при 2—8 °С.

При подозрении на СГВ-инфекцию различной локализации у новорожденных проводят сбор биологического материала для культурального и молекулярно-биологического исследования из соответствующих локусов (из предполагаемого очага инфекции) [1, 80, 84—86].

Бактериологическое исследование крови при наличии клинических признаков инфекции проводят обязательно. Взятие крови для микробиологического посева проводят из вены после двукратной обработки кожи стерильной салфеткой, смоченной кожным антисептиком. Через 1—2 мин с соблюдением правил асептики забирают кровь в коммерческие педиатрические флаконы для гемокультивирования. Для ряда коммерческих флаконов благодаря вакуумной аспирации крови необходимый объем крови поступает во флакон автоматически через иглу-бабочку и переходник. Объем крови для исследования должен составлять 0,1—1 мл.

При подозрении на менингит берут пробы спинномозговой жидкости, посредством люмбальной пункции или через шунт. Клинический материал немедленно доставляют в лабораторию в шприце или в стерильной пробирке/контейнере.

При первичном сборе вагинально-ректальных мазков в Lim-бульон образцы инкубируют 18—24 ч при 35—37 °C, что на 50% повышает выделение бактерий по сравнению с агаризированными транспортными средами общего назначения (AI) [88—91]. Посев проб с агаризированных транспортных сред и Lim-бульона проводят плотными непрерывными штрихами на хромогенную среду для селективного выделения СГВ. При использовании Lim-бульона для посева можно применить кровяной агар с 5% дефибринированной кровью (баранья, крупного рогатого скота или лошадиная).

При посеве мочи и других биологических жидкостей с количественной оценкой применяют метод секторных посевов на кровяной агар с 5% дефибринированной кровью [86] и хромогенную среду для селективного выделения СГВ, что позволяет повысить высеваемость [92—98]. Посевы культивируют в атмосфере 5% CO₂ при температуре 35—37 °С в течение 18—24 ч. При отсутствии роста инкубирование продлевается до 48 ч.

На кровяном агаре большинство штаммов S. agalactiae образуют гладкие, блестящие, мелкие (диаметром 0,5—2 мм) колонии с зоной β-гемолиза, реже встречаются бактерии с α-гемолизом или культуры без гемолиза. На хромогенных средах цвет колоний СГВ отличается в зависимости от производителя, поэтому необходимо руководствоваться инструкцией производителя. Для выделения S. agalactiae рекомендуется применение хромогенных сред, зарегистрированных в Российской Федерации. В зависимости от производителя цвет колоний СГВ может отличаться, поэтому при интерпретации результатов необходимо руководствоваться инструкцией.

Гемокультивирование при СГВ-сепсисе дает положительный результат в 60—70%, при пневмонии — приблизительно в 50% случаев, а при менингеальной форме инфекции этот показатель еще ниже [99—103]. Низкая чувствительность метода, по-видимому, обусловлена малым посевным объемом крови новорожденных и грудных детей. Кровь культивируют по стандартной методике посевов для аэробных (факультативно-анаэробных) микроорганизмов.

Выделенные на питательных средах