Заболевания пародонта ассоциировались с развитием сахарного диабета 2-го типа (СД2) в течение длительного времени. Еще в 1993 г. H. Löe [1] предложил рассматривать хронический генерализованный пародонтит (ХГП) как шестое осложнение СД2. В настоящее время СД2 рассматривается как фактор риска для развития, прогрессирования и тяжести клинического ХГП [2, 3]. В свою очередь длительное течение ХГП приводит к декомпенсации СД2, повышению уровня сахара в крови.

Прогрессирование ХГП обусловлено неспособностью иммунной системы удалить инфекционные агенты и восстановить гомеостаз пародонта. Нейтрофилы, а также моноциты и макрофаги у больных СД2 продуцируют больше медиаторов воспаления и АФК, которые могут способствовать разрушению тканей при заболеваниях пародонта [4, 5]. Кроме того, пациенты СД2 показывают повышенные уровни воспалительных цитокинов в десневой жидкости и тканях десны, таких как IL-1β и IL-6, по сравнению со здоровыми субъектами [6]. TNF-α также способствует разрушению тканей пародонта, усиливая воспалительный ответ и активируя остеокласты, ответственные за воспалительную резорбцию кости [7].

В течение последнего десятилетия появились новые терапевтические стратегии использования пробиотиков для профилактики и лечения кариеса, заболеваний пародонта и других заболеваний полости рта [8—10].

Цель работы — изучение влияния применения пробиотиков на состояние мукозального иммунитета больных СД2.

Обследовали 50 женщин среднего возраста (35—59 лет), страдающих СД2 (инсулиннезависимым) с ХГП средней тяжести, которые в дальнейшем были разделены на две группы. Основную группу пациентов составили 30 женщин, которым, кроме общепринятой терапии ХГП, дополнительно рекомендовались курсы приема пробиотического комплекса Асепта (Lactobacillus plantarum CECT 7481 и Lactobacillus brevis CECT 7480) по 1 таблетке в день в течение 30 сут на курс. Контрольную группу составили 20 пациентов без применения пробиотика. Результаты вторичной профилактики оценивали путем исследования мукозального иммунитета спустя 30 сут от начала наблюдения за больными.

Забор слюны проводили с 9.00 до 10.00. Перед сбором слюны пациент полоскал ротовую полость 100 мл теплого бледно-розового раствора марганцевого кислого калия. После этого в течение последующих 10—15 мин больной собирал слюну в сухую пробирку в количестве около 7 мл. Содержание в слюне ceкреторного иммуноглобулина A (sIgA) и провоспалительных (интерлейкина-1β (IL-1β), интерлейкина-6 (IL-6), интерлейкина-8 (IL-8), фактора некроза опухоли-α (TNF-α)) и противовоспалительных (рецепторного антагониста интерлейкина-1 (RAIL), интерлейкина-4 (IL-4), интерлейнина-10 (IL-10)) цитокинов определяли методом иммуноферментного анализа с использованием наборов фирмы «Вектор Бест» (Россия).

Статистическую обработку проводили с применением программы Statistica for Windows версии 7.0. Достоверным признавалось различие при критерии достоверности (t) не менее 2, что соответствует безошибочному прогнозу в 95,5% и вероятности ошибки не более 0,05.

Исследование полностью соответствовало этическим стандартам Комитета по экспериментам на человеке Хельсинкской декларации 1975 г. и ее пересмотренного варианта 2000 г.

Микробиологические и экспериментальные исследования показывают, что в этиопатогенезе ХГП основную роль играют патогенные анаэробные бактерии, определяемые как пародонтопатогены [11]. Основными пародонтопатогенами считаются Porphyromonas gingivalis, Treponema denticola, Fusobacterium nucleatum, Prevotella intermedia, а также относительный анаэроб Aggregatibacter actinomycetem comitans [12]. В то же время в недавних исследованиях было показано, что лактобациллы заселяют пародонтальные карманы у пациентов с ХГП и могут изменять состав микрофлоры полости рта посредством антагонистических взаимодействий с потенциально патогенными видами, и в частности они могут ингибировать рост пародонтопатогенов [13]. Штаммы Lactobacillus plantarum CECT 7481 и Lactobacillus brevis CECT 7480 проявляют значительную ингибирующую активность против широкого количества возбудителей заболеваний полости рта, таких как гингивит, периодонтит, кариес, галитоз, при одновременном проявлении минимального антагонизма к штаммам комменсалов оральной флоры человека. Более того, эти два штамма демонстрируют отсутствие ингибирующей активности между ними, что позволяет их совместное использование в одной формуле.

С другой стороны, уже хорошо документировано, что патогенез ХГП может определяться провоспалительным ответом цитокинов, выраженным, в частности, секрецией фактора некроза опухоли (TNF)-α, интерлейкина (IL)-1β, IL-6 и IL-8. Цитокины играют особую роль в индукции и развитии местного воспалительного ответа. TNF-α и IL-1β, продуцируемые главным образом моноцитами/макрофагами, стимулируют воспалительную реакцию хозяина, мобилизуя несколько процессов, таких как повышенная экспрессия молекул адгезии на эндотелиальных клетках сосудов, стимулированная продукция хемокиназ соединительной тканью и эндотелиальными клетками, а также высвобождение других медиаторов [14].

Как показывают данные последних лет, провоспалительный цитокиновый ответ может играть значительную роль в неспецифическом ответе на бактериальные и грибковые патогены, являющиеся также основным медиатором заболеваний пародонта. Более того, интенсивность провоспалительного цитокинового ответа, по-видимому, определяет тяжелую и умеренную клинические формы ХГП [15].

Результаты исследования концентрации провоспалительных цитокинов в слюне (IL-1β, IL-6, IL-8, TNF-α) приведены в табл. 1.

После лечения с использованием пробиотика выявлено достоверное снижение уровней IL-1β, TNF-α и IL-8 в слюне у пациентов основной группы, тогда как в контрольной группе отмечено только снижение концентрации IL-8. Падение уровня IL-8, главного из основных хемотаксических факторов нейтрофилов, с одной стороны, снижает уровень местного иммунитета, но, с другой стороны, угнетает воспаление, ингибируя продукцию кислородных радикалов, которые повреждают слизистую оболочку ротовой полости, таким образом способствуя активации процессов репарации. Полученные результаты позволяют также сделать вывод, что пробиотические штаммы Lactobacillus индуцируют снижение провоспалительного цитокинового ответа при ХГП. Этот вывод подтверждается экспериментальными исследованиями, показывающими, что пробиотические штаммы могут оказывать потенциальное иммуномодулирующее действие, подавляя экспрессию генов, кодирующих провоспалительные цитокины [16].

Избыточная и генерализованная продукция провоспалительных цитокинов приводит к развитию органных дисфункций. Для исключения таких проявлений воспалительного процесса в организме включаются механизмы негативного контроля, опосредованные продукцией противовоспалительных цитокинов и растворимых ингибиторов провоспалительных цитокинов. Противовоспалительный цитокин IL-10 хотя и широко экспрессируется в воспаленных тканях пародонта, связан со снижением тяжести ХГП [17]. Аналогичным образом было обнаружено, что концентрация IL-4 снижается в десневой жидкости у пациентов основной группы при лечении ХГП по сравнению с контрольной группой [18]. Содержание противовоспалительных цитокинов (RAIL, IL-4, IL-10) приведено в табл. 2.

В проведенном исследовании не было отмечено достоверной разницы между обеими группами по содержанию в слюне рецепторного антагониста IL-1, а также IL-4. Однако уровень основного противовоспалительного цитокина IL-10 достоверно повышался в основной группе по сравнению с контрольной (р>0,05).

Одним из основных показателей иммунитета слизистых оболочек является содержание секреторных иммуноглобулинов. Ключевая роль антител класса IgA состоит в предупреждении прикрепления бактерий и микробных токсинов к эпителию, абсорбции вредных ксенобиотиков. IgA являются важным элементом первой линии защиты против патогенов при ХГП [19].

Как видно из данных, представленных в табл. 3, уровень

Повышение уровня sIgA обусловливает снижение вероятности появления патогенной и условно-патогенной микрофлоры и вытеснения пробиотической микрофлоры в ротовой полости и таким образом приводит к снижению активности воспалительных процессов при ХГП.

Результаты проведенного клинико-лабораторного исследования доказали, что применение пробиотического комплекса Асепта на основе Lactobacillus приводит к снижению воспалительных процессов в ротовой полости пациентов с СД2. В слюнной жидкости пациентов, принимавших на фоне общепринятой терапии ХГП указанного пробиотического комплекса, отмечено снижение концентрации провоспалительных цитокинов IL-1β, TNF-α и IL-8 (соответственно на 54,32, 67,74 и 50,13% по сравнению с контрольной группой) при одновременном повышении противовоспалительного цитокина IL-10 (на 76,19% по сравнению с контрольной группой). Также у этих пациентов наблюдали усиление местного иммунитета слизистых, проявляющееся в повышении синтеза секреторного иммуноглобулина, А (на 73,68% по сравнению с контрольной группой). Проведенное исследование показало, что применение пробиотиков в терапии ХГП показано для эффективной стоматологической реабилитации больных, страдающих сахарным диабетом 2-го типа.

Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.

The authors declare no conflicts of interest.

Сведения об авторах

Малышев М.Е. — https://orcid.org/0000-0001-7549-682X

Иорданишвили А.К. — https://orcid.org/0000-0000-9328-2014

Присяжнюк О.В. — https://orcid.org/0000-0002-2657-178X

Бумай А.О. — https://orcid.org/0000-0002-4026-169X

КАК ЦИТИРОВАТЬ:

Малышев М.Е., Иорданишвили А.К., Присяжнюк О.В., Бумай А.О. Влияние пробиотиков на состояние секреторного иммунитета слюны у больных сахарным диабетом 2-го типа. Стоматология. 2019;98(6):26-29. https://doi.org/10.17116/stomat20199806126

Автор, ответственный за переписку: Малышев Михаил Евгеньевич — e-mail: malyshev1972@yandex.ru