Современный этап развития медицины в сфере оказания экстренной помощи и реабилитации неврологических больных, перенесших черепно-мозговую травму (ЧМТ), позволяет констатировать увеличение выживаемости подобных пациентов. Наряду с этим у них все чаще обнаруживают малоизученные явления, обусловленные нарушением функции гипоталамо-гипофизарной системы. Особый интерес вызывают изменения в мужских половых железах (МПЖ). Проведенные ранее исследования МПЖ при различных видах и механизмах внезапной смерти, а также при атеросклерозе и наркомании выявили высокую чувствительность эпителиосперматогенного слоя и эндокринного аппарата к различным повреждающим факторам как экзогенной, так и эндогенной природы [1—3]. Вместе с этим морфологические изменения МПЖ при ЧМТ до настоящего времени остаются практически неизученными.
Цель работы — изучение морфологических изменений мужских половых желез при ЧМТ в отсроченном периоде — через 21 сут после получения ЧМТ.
С помощью общепринятых гистологических и морфометрических методов изучены половые железы 5 умерших от ЧМТ через 21 сут в возрасте 28—50 лет. Отбор материала проводили с учетом того, что в возрасте от 28 до 50 лет морфологическая структура половых желез и процессы сперматогенеза в нормальных условиях характеризуются определенной стабильностью [4—5]. Во всех исследованных случаях атеросклеротические изменения сосудов были минимальными (менее 6%), отсутствовали морфологические признаки эндокринных заболеваний. Группу контроля составили шесть секционных наблюдений лиц того же возраста, погибших от ЧМТ на месте дорожно-транспортного происшествия. Половые железы извлекали из окружающих тканей не позднее 10 чс момента наступления смерти, освобождали от влагалищных оболочек, придатка и подвергали раздельному взвешиванию и определению объема. Морфологическое состояние всех компонентов половой железы оценивали по результатам комплексного стереологического исследования с помощью полуавтоматического компьютерного анализа методом точечного счета [6]. Определяли морфологические изменения белочной оболочки, сети половой железы, канальцев и стромы. Для объективной оценки состояния сперматогенеза вычисляли индекс сперматогенеза (ИС): отношение количества сперматогенных клеток той или иной клеточной ассоциации к числу сустентоцитов в данном сегменте извитого семенного канальца [7]. Кроме того, для оценки степени морфологического повреждения извитых семенных канальцев определяли площадь их поперечного сечения и толщину стенки. Результаты исследований подвергали статистической обработке с помощью программы Microsoft Excel 2010.
Результаты и обсуждение
Общеизвестно, что объем и размеры яичек характеризуются однотипной возрастной динамикой с резким уменьшением их значений после 60 лет. Это определяет возможность использования их в качестве количественных возрастных маркеров репродуктивного и старческого возраста человека [4, 5]. При макроскопическом исследовании половых желез умерших через 21 день после ЧМТ наблюдали дряблую консистенцию органа, утолщение влагалищных и белочной оболочек, уменьшение наружного размера, массы и объема органа. Масса обеих половых желез у лиц, умерших в возрасте 28—50 лет в отдаленные сроки после ЧМТ, колебалась от 20,5 до 47 г, составляя в среднем 30,7 г, и была статистически достоверна (р<0,001) меньше, чем у лиц, погибших на месте происшествия. Степень атрофии половых желез достигала 45,7%. Компьютерный морфометрический анализ тотальных срезов половых желез позволяет объективно оценить изменения белочной оболочки, сети семенника, а также параметра канальцы+строма. В целом процесс склерозирования белочной оболочки сопровождался достоверным (p<0,05) уменьшением на 37,84% среднего абсолютного объема этого структурного компонента в половых железах умерших в отдаленные сроки после ЧМТ. Микроскопически обнаружили снижение числа клеточных соединительнотканных элементов во внутреннем слое белочной оболочки, сопровождающееся увеличением количества коллагеновых волокон. Средний абсолютный объем сети семенника статистически достоверно (р<0,01) был уменьшен на 40,47%. Канальцы сети половых желез причудливо деформированы, просвет канальцев сети уменьшен, содержит клеточный детрит. В цитоплазме сустентоцитов сети, имеющих преимущественно кубическую или уплощенную форму, определялись включения липофусцина. У лиц, умерших в отдаленные сроки после ЧМТ, обнаружили уменьшение среднего абсолютного объема параметра канальцы+строма на 43,73% (р<0,001).
При стереологическом исследовании обнаружили достоверное уменьшение среднего относительного объема канальцев на 17,7% по сравнению с контрольной группой. Компьютерная морфометрия позволила установить, что площадь поперечного сечения канальцев в отдаленном периоде ЧМТ составила 28,07±1,58×103 мкм2 и достоверно не отличалась от этого показателя в группе контроля. Толщина стенки извитых семенных канальцев в этой же группе лиц равна в среднем 6,8 мкм, как и площадь поперечного сечения канальцев, практически не была как в контрольной группе. Количество сустентоцитов на поперечном срезе канальца при ЧМТ в среднем составила 17,74 и достоверно не отличалось от аналогичного показателя в группе контроля.
Во всех наблюдениях обнаружили нарушение дифференцировки сперматогенных клеток очагового характера. Количество канальцев с дифференцированными клеточными ассоциациями оказалось в среднем 41,4% от всех канальцев на плоскости гистологического среза. В то же время количество клеток, входящих в ассоциации, было меньше. Канальцы, не содержащие сперматид, но имеющие в своем составе сперматоциты и сперматогонии, рассматриваются как неполные (недифференцированные) клеточные ассоциации. Среднее количество канальцев с недифференцированными клеточными ассоциациями составило 31,4% от всех канальцев на плоскости среза. В отдельных канальцах обнаружили полное отсутствие всех типов сперматогенных клеток за исключением сперматогоний. Наряду с этим определились отдельные канальцы или даже группы канальцев, в которых сохранены только сустентоциты, что свидетельствует об очаговом синдроме «только клетки Сертоли» (ТКС). Среднее количество подобных канальцев составило 22,1% от всех канальцев на плоскости среза. Все это внешне придает гистологической картине полиморфный вид, что и послужило поводом для некоторых исследователей называть такую картину пестрой атрофией половых желез (рис. 1).
Индекс сперматогенеза оказался уменьшенным на 62,2% по сравнению с таковым в группе сравнения и контроля. При дифференцированном подсчете сперматогенных клеток, проведенном в сохранившихся дифференцированных клеточных ассоциациях, обнаружили достоверное уменьшение практически всех типов клеточных элементов. Наблюдали уменьшение среднего количества сперматид типа D по отношению к сустентоцитам на 78,1%, типа С на 80,3% и типа В с овальными и округлыми ядрами соответственно на 79,4 и 81,2%, а сперматид типа, А — на 64,7%. Среднее количество митотически делящихся сперматоцитов I—II порядка по отношению к сустентоцитам оказалось уменьшено соответственно на 68,3 и 88,2%; диплотенных, пахитенных, зиготенных, лептотенных и прелептотенных сперматоцитов достоверно уменьшено соответственно на 56,3, 51,9, 34,65, 41,3 и 45,8% по сравнению с контрольной группой. При определении среднего количества светлых и темных сперматогоний типа А, а также удлиненных, располагающихся изолированно сперматогоний по отношению к сустентоцитам в дифференцированных клеточных ассоциациях, не выявили достоверных отличий от аналогичных показателей в группе сравнения и контроля.
Наряду с этим определялся выраженный в той или иной степени очаговый синдром ТЛС (рис. 2). В одних поперечных срезах канальцев обнаруживалась небольшая зона исчезновения сперматогенных клеток, которая может занимать до ¼ части среза извитого семенного канальца (сектор). В других канальцах выявили участки, в которых сперматогенные клетки отсутствовали на ½ площади поперечного среза. Выявили поля зрения, в которых поперечный срез сегмента канальца представлен только сустентоцитами — очаговый синдром ТКС. В окружающих канальцах сперматогенные клетки сохранены, что в целом придает своеобразную пестроту поверхности гистологического среза и лежит в основе морфологического синдрома «пестрая атрофия половых желез», хорошо знакомого морфологам, занимающимся диагностикой мужского бесплодия. В некоторых наблюдениях определялись резко уменьшенные в объеме, спавшиеся канальцы с гиалинизированными или склерозированными стенками, в которых центральный просвет едва различим, а клеточные элементы эпителиосперматогенного слоя отсутствовали (рис. 3).
Выводы
1. Данные исследования свидетельствуют, что через 21 сут после ЧМТ происходит уменьшение массы половых желез на 45,7% по сравнению с контрольной группой и объемной фракции тканевых компонентов, составляющих орган: белочной оболочки, сети семенника, извитых семенных канальцев.
2. В половых железах мужчин, умерших в отдаленные сроки после ЧМТ, обнаруживается достоверно выраженное уменьшение среднего количества сперматогенных клеток на основных этапах сперматогенеза: роста, созревания и формирования, что в целом может быть охарактеризовано как «пестрая атрофия половых желез».
3. Деструктивные изменения в эпителиосперматогенном слое у мужчин, умерших в отдаленные сроки после ЧМТ, ведут к очаговому, а затем и к тотальному синдрому ТКС, что и является морфологической основной транзиторной герминальной аплазии.
Конфликт интересов: авторы статьи подтвердили отсутствие финансовой поддержки/конфликта интересов, о которых необходимо сообщить.