Индуцируемый гипоксией фактор (HIF) выполняет в клетке функцию кислородного сенсора и инициатора каскада метаболических реакций, позволяющих приспосабливаться к недостатку кислорода. Неадекватные сдвиги регуляции активности HIF вовлечены в общий для всех канцерогенных воздействий механизм метаболического перепрограммирования. Изоформы HIF1α и HIF2α часто играют разные роли в разнообразных физиологических и патологических состояниях. МикроРНК miR-155 также вовлечена в канцерогенез, воздействуя на пролиферацию и выживание опухолевых клеток, при этом ее проонкогенный потенциал может определяться дисбалансом транскрипционных факторов HIF1α и HIF2α за счет избирательного связывания только с мРНК HIF1A. Параллельного определения уровня двух мРНК HIF1A и HIF2A, как и исследования их взаимосвязи с уровнем miR-155 у пациентов с хроническим лимфолейкозом (ХЛЛ) ранее не проводилось.

ЦЕЛЬ РАБОТЫ

Выявление возможного участия микроРНК miR-155 в сдвигах экспрессии мРНК HIF1A и HIF2A в клетках крови пациентов с ХЛЛ.

МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ

В работе была использована 41 проба венозной крови пациентов с ХЛЛ и 52 пробы крови здоровых доноров, отобранные в вакуумные системы с раствором стабилизатора мРНК и в вакуумные системы с ЭДТА для детекции уровня микроРНК miR-155. Выделение мРНК и обратную транскрипцию осуществляли с использованием наборов реагентов «Рибо-золь-D» и «Реверта-L» соответственно. Уровень экспрессии HIF1A и HIF2A определяли методом ПЦР-РВ. Выделение микроРНК осуществляли с использованием микроколонок. Обратную транскрипцию проводили с использованием специфического к hsa-miR-155-5p петлевого праймера.

РЕЗУЛЬТАТЫ

Уровни мРНК обоих изоформ HIFα в стабилизированных пробах венозной крови были значимо ниже у пациентов с ХЛЛ в сравнении с группой контроля. Между miR-155 и мРНК HIF1А, но не с HIF2A, наблюдалась слабая обратная корреляционная связь (r= –0,51; p=0,03). Значения экспрессии исследуемых генов не коррелировали с уровнем лейкоцитов или клинической стадией заболевания. При этом уровень микроРНК miR-155 был повышен только у пациентов до назначения терапии.

ВЫВОДЫ

Впервые проведено параллельное исследование уровня экспрессии мРНК HIF1A, HIF2A и miR-155 в венозной крови у пациентов с ХЛЛ. Полученные данные подтверждают важность поиска диагностического значения показателей соотношения экспрессии изоформ HIFα и miR-155 в отдельных субпопуляциях лейкозных клеток как дополнительных маркеров индивидуального прогноза развития заболевания и эффективности терапии.