ЦЕЛЬ ИССЛЕДОВАНИЯ

Разработка методики определения 2,4-диметилгидроксибензола (2,4-ДМГОБ) в биологическом материале. Аналитическими методами, используемыми в процессе выполнения экспериментов, являлись экстракция, колоночная хроматография обычного давления, ТСХ, ГХ-МС и ВЭЖХ. Для извлечения аналита из биоматрицы применяли настаивание с бинарным изолирующим агентом диметилкетон— этилацетат (3:7), соблюдая массовое отношение «изолирующий агент— матрица» (2:1). Оптимальные условия полупрепаративного хроматографирования аналита достигались в колонке (150×10 мм) сорбента «Силасорб» С-18 при вымывании смесью ацетонитрил—вода (7:3), что было использовано в предложенной схеме очистки, сочетающей экстракцию и обращеннофазовую колоночную хроматографию. Для селективного определения 2,4-ДМГОБ методом ТСХ (пластины «Сорбфил») обосновано применение подвижной фазы тетрахлорметан-диоксан (9,5:0,5). Показана целесообразность подтверждающей идентификации аналита в виде 2,4-диметилтриметилсилилфенола с использованием ГХ-МС (колонка DB-5MS EVIDEX (25 000×0,2 мм), стационарная фаза (5%-фенил)-метилполисилоксан, газ-носитель — гелий). Группа характерных частиц в масс-спектре триметилсилильного производного аналита представлена ионами 45; 59; 73; 82; 91; 105; 119; 135; 149; 163; 179; 194 m/z. Для подтверждающей идентификации и оценки количественного содержания 2,4-ДМГОБ применена ВЭЖХ (колонка Discovery С18 250×4,6 мм, элюирующая жидкость — ацетатный буферный раствор с pH 5,5 — ацетонитрил, 50:50). Предложена методика определения 2,4-ДМГОБ методом ВЭЖХ в биоматериале (ткани печени), которая отвечает критериям линейности, селективности, правильности, прецизионности и стабильности. Минимальное обнаруживаемое количество 2,4-ДМГОБ в биоматрице — 0,5 мкг/г, минимальное определяемое количество — 1,2 мкг/г.