Использование обогащенной тромбоцитарными факторами роста аутоплазмы в хирургии и травматологии - СТАТЬЯ ОТОЗВАНА (РЕТРАГИРОВАНА) 15.04.2017

Авторы:
  • Е. Е. Ачкасов
    Кафедра госпитальной хирургии №1, кафедра лечебной физкультуры и спортивной медицины лечебного факультета Первого Московского государственного медицинского университета им. И.М. СеченоваМинздрава РФ; Научный центр биомедицинских технологий Федерального медико-биологического агентства России, Москва
  • А. А. Ульянов
    Кафедра госпитальной хирургии №1, кафедра лечебной физкультуры и спортивной медицины лечебного факультета Первого Московского государственного медицинского университета им. И.М. СеченоваМинздрава РФ
  • Э. Н. Безуглов
    Кафедра госпитальной хирургии №1, кафедра лечебной физкультуры и спортивной медицины лечебного факультета Первого Московского государственного медицинского университета им. И.М. СеченоваМинздрава РФ
  • А. В. Пугаев
    Кафедра госпитальной хирургии №1, кафедра лечебной физкультуры и спортивной медицины лечебного факультета Первого Московского государственного медицинского университета им. И.М. СеченоваМинздрава РФ
  • К. А. Володина
    Кафедра госпитальной хирургии №1, кафедра лечебной физкультуры и спортивной медицины лечебного факультета Первого Московского государственного медицинского университета им. И.М. СеченоваМинздрава РФ
  • Н. К. Жижин
    Кафедра госпитальной хирургии №1, кафедра лечебной физкультуры и спортивной медицины лечебного факультета Первого Московского государственного медицинского университета им. И.М. СеченоваМинздрава РФ
  • О. Н. Егорова
    Кафедра госпитальной хирургии №1, кафедра лечебной физкультуры и спортивной медицины лечебного факультета Первого Московского государственного медицинского университета им. И.М. СеченоваМинздрава РФ
Журнал: Хирургия. Журнал им. Н.И. Пирогова. 2014;(9): 48-54
Просмотрено: 1103 Скачано: 1184

Редакционная коллегия сообщает, что своим решением от 15.04.17 публикация статьи Е.Е. Ачкасов, А.А. Ульянов, Э.Н. Безуглов, А.В Пугаев, К.А. Володина, Н.К. Жижин, О.Н. Егорова «Использование обогащенной тромбоцитарными факторами роста аутоплазмы в хирургии и травматологии». Хирургия. Журнал им. Н.И. Пирогова. 2014;9:48-54 признана недействительной, статья отзывается (ретрагируется) из научного оборота. Причина отзыва статьи – обнаружение значительного объема дублирующей информации в ранее опубликованной статье Е.Е. Ачкасов, Э.Н Безуглов., А.А. Ульянов, В.В. Куршев, А.Д. Репетюк, О.Н. Егорова «Применение аутоплазмы, обогащенной тромбоцитами, в клинической практике». Биомедицина. 2013;4:1:46-59. Информация об отзыве статьи направлена во все базы данных, где индексируется журнал «Хирургия. Журнал им. Н.И. Пирогова».

С начала ХX века врачам известен положительный эффект аутогемотерапии. В 1905 г. хирург Август Бир провел первый эксперимент по использованию аутогемотерапии для лечения переломов, создавая искусственные гематомы. В дальнейшем врачи неоднократно использовали аутогемотерапию, чтобы стимулировать защитные реакции больных хроническими воспалительными, инфекци­онными заболеваниями, фурункулезом [1, 8]. При аутогемотерапии отмечена активизация репарации при травмах, ранах, хирургических вмешательствах, гнойных заболеваниях кожи и мягких тканей [4, 22, 48].

В «Очерках гнойной хирургии» В.Ф. Войно-Ясенецкого подробно описано применение аутогемотерапии во время его работы в военном госпитале в 1904-1905 гг. [7]. Хорошие результаты и минимальная частота побочных эффектов на многие годы сделали аутогемотерапию и аутосеротерапию часто используемыми вспомогательными методами лечения рецидивирующих или вялотекущих гнойных процессов и длительно незаживающих ран вплоть до начала эры антибиотиков с широким антимикробным спектром действия [1]. Однако после смерти В.Ф. Войно-Ясенецкого эти методы лечения стали применять реже.

В Калифорнийском университете в 1965 г. для стимуляции остеогенеза дефектов костей лицевого скелета применена обогащенная тромбоцитами плазма как фактор, способствующий увеличению количества остеоиндуктивного морфогенетического белка. Ученые руководствовались работами коллег, посвященными выраженной остеогенной и хондрогенной активности субстанции, содержащейся в α-гранулах тромбоцитов [6, 51]. В дальнейшем такая методика нашла широкое применение в различных областях медицины под названием «тромбоцитарный концентрат» или «тромбоцитарный гель».

Показана способность факторов роста нормализовать структуру ткани и ее реакции на повреждение, отмечены важная роль и эффективность использования факторов роста для восстановления поврежденных тканей [28, 38, 40, 43], поэтому использование факторов роста представляется полезным в клинической практике, поскольку это способствует быстрому излечению с восстановлением полноценной ткани и обеспечивает быстрое и без­опасное возвращение к неограниченной деятельности. Богатая тромбоцитами плазма - простой, дешевый и минимально инвазивный способ получения естественной концентрации аутологичных факторов роста, поэтому в настоящее время широко проводятся эксперименты для выявления ее способности улучшать регенерацию ткани с низким заживляющим потенциалом.

Хотя секреция факторов роста происходит главным образом в течение первого часа от начала применения, тромбоциты остаются жизнеспособными в течение 7 дней и продолжают генерировать факторы роста, поэтому было высказано предположение, что одна единственная инъекция в поврежденную ткань могла бы быть достаточной для лечения в большинстве клинических наблюдений [36]. Исходя из этого, казалось бы, ясно, что данный перспективный инновационный подход следует применять как можно шире в клинической практике, однако существующие данные по использованию обогащенной тромбоцитарными факторами роста аутоплазмы (ОТФРА) в доклинических и клинических исследованиях спорны [18, 47]. Если публикации, в которых рассматривается роль изолированных факторов роста при регенерации ткани, широко представлены, то клинических исследований, демонстрирующих реальный потенциал ОТФРА в отношении восстановления тканей, недостаточно.

Механизм действия ОТФРА. Известна роль тромбоцитов в гемостазе, но они также играют ключевую роль как промежуточное звено в процессе заживления поврежденной ткани за счет способности выделять из своих α-гранул факторы роста [34, 49]. Тромбоциты содержат тромбоцитарный фактор роста (PDGF), трансформирующий фактор роста (TGF-β), эпидермальный фактор роста (PDEGF), сосудистый фактор эндотелиального роста (VEGF), инсулиноподобный фактор роста (IGF), фибробластический фактор роста (βFGF) и эпидермальный фактор роста (EGF) [22, 48, 21] (табл. 1).

α-Гранулы являются также источником цитокинов, хемокинов и многих других белков [12], по-разному вовлеченных в стимулирование хемотаксиса, пролиферацию и созревание клеток, модуляцию подстрекательских молекул и привлечение лейкоцитов (табл. 2).
Кроме того, тромбоциты хранят антибактериальные и фунгицидные белки, способные предотвращать инфекции, протеазы, такие как металлопротеаза-4 и факторы коагуляции [12]. Помимо α-гранул, тромбоциты содержат плотные гранулы, которые хранят и выделяют после активации АДФ, ATФ, ионы кальция, гистамин, серотонин и допамин [37]. Наконец, тромбоциты содержат лизосомные гранулы, которые могут секретировать кислотные гидролазы, катепсин D и E, эластазы и лизозим [13] и, наиболее вероятно, другие, еще недостаточно хорошо изученные молекулы, роль которых в процессе восстановления ткани нельзя недооценивать. Тот факт, что тромбоциты секретируют факторы роста и активные метаболиты, означает, что их прикладное использование может оказать положительное влияние в клинических ситуациях, требующих быстрого эффекта и регенерации ткани. ОТФРА является источником получения факторов роста и многих других биологически активных молекул, а их применение в форме тромбоцитарного геля (клейкая пленка) могло бы в дальнейшем стать преимуществом, обеспечивающим их секрецию в нужной зоне [13].

ОТФРА определяется как производное крови с более высокой концентрацией тромбоцитов по сравнению с исходной кровью, полученное центрифугированием аутологичной цельной крови [6]. Более детально элементы ОТФРА единообразно не были описаны в литературе. ОТФРА - это плазма, концентрация тромбоцитов в которой превышает нормальную в 3-3,5 раза. В норме концентрация тромбоцитов в среднем 220 000 клеток в 1 мкл. Клинически эффективной считают концентрацию тромбоцитов в ОТФРА приблизительно 400% их уровня в периферической крови, т.е. она должна содержать ≥1 млн тромбоцитов в 1 мкл [36]. Однако в литературе сообщается о большей вариабельности концентрации тромбоцитарных факторов роста [17], клиническая эффективность их была продемонстрирована даже в меньшей концентрации [17, 48].

Существование различных способов получения обогащенной плазмы, различные концентрации тромбоцитов, возможность присутствия лейкоцитов в тромбоцитарном концентрате и ряд других факторов искажают результаты исследований, усложняют как доклинические исследования в этой области, так и клиническую оценку эффективности этого подхода для ускорения процессов репарации тканей.

ОТФРА содержит семь основных факторов роста: PDGF, pDEGF, TGF (α и β), VEGF, EGF, FGF и IGF [1, 21, 48].

Эндогенные факторы роста находятся в определенном соотношении. Эндоцеллюлярное количество факторов роста детерминировано на генетическом уровне, сфера их воздействия - рецепторы клеточных мембран стволовых клеток, где проявляется высокая степень аффинности, вызывающая пролиферацию последних. Эти субстанции (PDGF, VEGF, TGF и др.) обладают олигопептидной структурой и принадлежат к группе факторов роста, к которым также относятся pDEGF, инсулин и некоторые другие, отличительной чертой которых является продолжительное время начального воздействия на рецепторы и повышенная степень аффинности [36].

В отличие от истинных мутагенов (ионизирующее излучение, канцерогены, недоокисленные радикальные группы и прочие), факторы роста не воздействуют на наследственный хромосомный аппарат клетки, а влияют на мембранные клеточные рецепторы I и II типов, что способствует ускорению роста и дифференцировке здоровых клеток-предшественников. Основным результатом исследований в этом разделе остеологии является широкое применение ОТФРА при лечении дефектов костей челюстно-лицевой области, в том числе при вживлении имплантатов [50].

PDGF-BB является основным фактором (митогеном) для определенных групп клеток: фибробластов, клеток гладкой мускулатуры и других типов клеток. PDGF играет главную роль в эмбриогенезе и регенерации поврежденных тканей. Выявлено и доказано его хемоаттрактантное и пролиферативное влияние на все клетки, принимающие участие в процессе заживления ран, отмечено выраженное влияние на клетки мезенхимального происхождения. Активированные тромбоциты являются главным источником PDGF-BB. Изначально PDGF обнаружили в сыворотке крови, но он отсутствует в свободной от клеток плазме крови [25]. Синтез PDGF происходит не в тромбоцитах, а в мегакариоцитах, он накапливается в α-гранулах. При разрушении одного тромбоцита высвобождается примерно 1200 молекул PDGF [4]. Общая концентрация всех изоформ PDGF в сыворотке крови поддерживается на постоянном уровне и составляет 50-60 нг/мл. Межклеточный коллагеновый матрикс связывает PDGF [19, 39].

Клетки в организме контактируют с плазмой и тканевой жидкостью, поэтому местная секреция PDGF играет значимую роль в регуляции их пролиферации [53]. В процесс заживления раны вовлекаются клетки, находящиеся непосредственно в зоне повреждения. Активация и распад тромбоцитов являются стартом для процесса заживления ран. PDGF-BB индуцирует направленное перемещение (хемотаксис) основных клеточных типов, принимающих участие в процессе репарации, - лейкоцитов, макрофагов, фибробластов [11, 53]. В различных типах клеток при стимуляции PDGF происходит секреция PDGF-подобных медиаторов и повышается уровень экспрессии генов PDGF [27].

Тромбоциты содержат плотные гранулы с биологически активными веществами, они не являются факторами роста, но принимают участие в биохимических и обменных процессах в организме, в том числе в воспалительных и регенеративных реакциях [1] (табл. 3).

Методика получения ОТФРА. Обогащенную тромбоцитами аутоплазму получают путем центрифугирования цельной крови [1, 3, 4, 36]. Производят забор 36 мл венозной крови в 4 пробирки объемом по 9 мл с противосвертывающим компонентом (цитрат). Далее кровь центрифугируют, чаще применяя стандартный протокол - 1800 об/мин в течение 8 мин. Лабораторным пипетом снимают фракцию плазмы, наиболее богатую тромбоцитами (средний слой, фракция 3) объемом 1 мл из каждой пробирки, не прикасаясь к нижнему слою, состоящему пре­имущественно из эритроцитов и лейкоцитов. Не забирают и самый верхний слой содержимого пробирки (фракция 1) ввиду низкой концентрации в нем тромбоцитов.

Используют инъекционный способ введения 2-4 мл ОТФРА в патологически измененную зону [1, 4, 5, 20, 35] или аппликацию на раневую поверхность [10, 23].

Использование ОТФРА в клинической практике

Травматология. Применение ОТФРА с целью оптимизации процессов репаративного остео- и хондрогенеза помогло улучшить результаты хирургического лечения больных с дефектами костной и хрящевой тканей [6]. Методика применена при оскольчатых внутрисуставных переломах для адгезии свободно лежащих фрагментов хряща с субхондральной костью, что позволило избежать их удаления или фиксации имплантатами. Другие авторы использовали факторы роста у больных после артроскопического вмешательства на плечевом суставе в связи с повреждением его вращательной манжеты, а также при замещении дефекта манжеты мембраной из аутологичного насыщенного факторами роста фибрина. В этих исследованиях получены положительные результаты: уменьшение интенсивности болевого синдрома и заживление дефекта манжеты плеча через 6 мес [35]. Опубликована работа, в которой проведена оценка безопасности и результатов восстановления вращателя плеча с использованием факторов роста в рамках пилотного исследования в 14 наблюдениях, получены многообещающие устойчивые результаты по итогам 24-месячного наблюдения [44].

Некоторые исследования посвящены эффективности применения факторов роста при хронических повреждениях капсульно-связочного аппарата. Сообщено о хороших результатах, которые были достигнуты при лечении хронического тендиноза локтевого сустава с выраженным болевым синдромом [37]. Данные об эффективности использования факторов роста были подтверждены и в другой работе, в которой отмечен более значимый эффект их применения по сравнению с таковым после инъекций кортикостероидов при однолетнем наблюдении [42]. В другом исследовании описаны предварительные результаты многократных инъекций факторов роста при тендинопатии собственной связки надколенника и сделано заключение о безопасности и перспективности этой методики [20, 30, 52]. В исследовании с участием 15 больных с хроническим синдромом «колена прыгуна» сообщено, что после предыдущего консервативного или хирургического лечения, не давшего желательного улучшения, были применены многократные инъекции ОТФРА, в результате чего у большинства пациентов наступило заметное улучшение и они смогли восстановить прежнюю повседневную активность [20].

Применение ОТФРА имеет большой потенциал при лечении повреждений боковых и крестообразных связок коленных суставов [31, 54]. Повреждения медиальной коллатеральной связки (МКС) являются одними из наиболее распространенных среди активного населения, неадекватное лечение таких повреждений может приводить к раннему развитию остеоартроза в 13% наблюдений [33, 34]. В связи с этим в настоящее время существует потребность в методе, способном ускорить и сделать более качественным заживление этой связки. Опубликованы данные об улучшении показателей максимальной нагрузки на разрыв и окончательных показателей на растяжение после использования ОТФРА при повреждении МКС у кроликов [26]. В другом исследовании показано увеличение прочности связки на 73% в течение 12 дней от начала использования факторов роста [32]. Есть статьи, в которых сообщают о многообещающих результатах использования тромбоцитарных факторов роста (ТФР) для лечения связки, если они применялись в соответствующих дозах вскоре после травмы [14].

Имеются работы, описывающие положительный эффект внутрисуставных инъекций аутоплазмы по сравнению с таковым при использовании традиционных методов лечения остеоартрозов крупных суставов. Наиболее значимый эффект получен при лечении гонартроза по сравнению с другими разновидностями остеоартроза. Проведенное лечение позволило в короткие сроки ликвидировать болевой синдром, улучшить функцию суставов, значимо сократить длительность болевого синдрома и увеличить продолжительность ремиссии [20, 30, 48].

Применены инъекции тромбоцитарного концентрата при лечении больных остеоартритом коленного сустава с использованием в качестве контроля инъекций гиалуроновой кислоты, при этом отмечено более эффективное обезболивание и улучшение функции при использовании ОТФРА [48].

На основании результатов лечения 100 больных гонартрозом с помощью внутрисуставных инъекций ОТФРА сделаны выводы о безопасности метода, уменьшении болевых ощущений и улучшении функции коленного сустава в течение как минимум 9 мес. В качестве побочных эффектов указаны минимальное количество умеренно выраженных болевых реакций и местный тканевый отек, которые сохранялись не более 2 дней [30]. У этих больных через 2, 6 и 12 мес отмечалось статистически достоверное улучшение по всем оцениваемым параметрам. Тенденция к ухудшению наблюдалась при однолетнем и двухлетнем наблюдениях. Более длительным был эффект у молодых людей с низким индексом массы тела и незначительной степенью повреждения хряща, тогда как в других группах пациентов результаты оказались менее устойчивыми [20].

Восстановление ткани при скелетно-мышечных травмах часто происходит медленно, а в некоторых наблюдениях процесс остается незавершенным [15, 41]. Влияние скелетно-мышечных повреждений на качество жизни и работоспособность спортсменов или профессиональных атлетов значительно больше, чем обычных людей, поэтому быстрое восстановление полной работоспособности и возвращение к соревнованиям имеют главенствующее значение [47]. Многочисленные исследования показали хорошие результаты лечения повреждений сухожилий различной локализации с использованием ОТФРА [16, 29]. Основным сдерживающим фактором ее использования у спортсменов до недавнего времени являлся недостаточный объем клинических исследований [36].

В то же время ОТФРА уже довольно активно применяются для улучшения и ускорения восстановления капсульно-связочного аппарата, а большинство исследований в этой области уже охватывает и доклиническую и клиническую стадии ее применения [5, 36]. ОТФРА в настоящее время используется при лечении наиболее частых повреждений различных структур опорно-двигательного аппарата, применение этого метода приобретает все больше сторонников [37, 44].

Использованы ТФР при лечении повреждений суставного хряща у футболистов и получено ускоренное и полное восстановление суставного хряща с быстрым возобновлением спортивной деятельности без признаков перенесенной травмы [48]. В ряде других исследований при лечении хронических повреждений ахиллова сухожилия отмечено более быстрое восстановление функций при минимальном количестве осложнений у спортсменов, при лечении которых применяли ОТФРА, что сокращало общие сроки лечения [46, 48]. Многократные инъекции ОТФРА использовались при лечении острого частичного разрыва ахиллова сухожилия у спорт­сменов. При этом наблюдалось более быстрое восстановление ткани, зафиксированное с помощью МРТ и УЗИ, что позволило в кратчайшие сроки полностью восстановить функцию конечности и обеспечить возвращение к полноценной спортивной деятельности [20]. Показана эффективность ТФР при лечении повреждений мышц бедра у футболистов, причем эффективность оставалась одинаково высокой при повреждениях любой тяжести [24, 45].

Хирургия. Применение обогащенной аутоплазмы в лечении трофических язв голени венозной этио­логии гарантирует широкий спектр местных и системных лечебных воздействий, позволяет улучшить результаты последующей аутодермопластики и в короткие сроки выполнить хирургическое лечение, направленное на ликвидацию вено-венозных рефлюксов, это способствует сокращению сроков лечения, улучшению качества жизни и снижению стоимости лечения. Применение ОТФРА технически несложно, что позволяет использовать метод повсеместно [9].

В челюстно-лицевой хирургии ОТФРА применяют для улучшения качества регенерата и ускорения имплантирования «анкеров» [50].

Показано, что обработка послеоперационной раны ОТФРА стимулирует репаративные процессы в ней, способствуя сокращению сроков заживления и улучшению результатов лечения [2].

Отдельного внимания заслуживает воздействие раневой повязки, состоящей из тонкой коллагеновой губки в сочетании с PDGF-BB, на процесс заживления ран при ожогах IIIA степени [7]. Местное лечение ожоговых ран с применением биологической повязки на основе коллагена типа I с PDGF-BB приводит к сокращению сроков эпителизации до 5-7 сут и предупреждает развитие местных гнойно-некротических осложнений, что в 2-3 раза ускоряет процесс регенерации эпителия ран при ожогах IIIА степени и позволяет сократить период стационарного лечения.

Есть опыт применения гелевой формы аутоплазмы в области лунок удаленных зубов. В тех лунках, которые заполняли плазмой в виде геля, в более короткие сроки отмечались больший объем лучше организованной кости и более быстрая эпителизация раны [23].

Таким образом, использование обогащенной тромбоцитарными факторами роста аутоплазмы в настоящее время прочно заняло свое место в клинической практике. Учитывая универсальный механизм действия, ее применяют в различных отраслях медицины и потенциал ее использования еще далеко не исчерпан. К преимуществам методики можно отнести безопасность и низкую себестоимость. В то же время ее использование требует строгого соблюдения протокола, который при разных заболеваниях может различаться. Доступность метода и его эффективность открывают перспективы его более широкого использования в хирургии, в том числе гнойной, травматологии, комбустиологии и спортивной медицине.

Список литературы:

  1. Аминова З.М., Емелин А.Л., Овечкина М.В., Калянова Е.В. Применение богатой тромбоцитами плазмы в ортопедии. Технология Plasmolifting ТМ. Процедура Orthoplasma. Методическое пособие для врачей. М 2012.
  2. Ачкасов Е.Е., Ульянов А.А., Ан В.К., Безуглов Э.Н. Использование аутоплазмы, обогащенной тромбоцитарными факторами роста, в лечении абсцесса эпителиального копчикового хода. Хирургия 2013; 12: 43-47.
  3. Башкина А.С., Широкова Л.Ю., Абросимова Е.Б., Бахтиярова Т.И., Носков С.М. Обогащенная тромбоцитами плазма в лечении болевого синдрома большого вертела. Спортивная медицина: наука и практика 2012; 1: 7-10.
  4. Безуглов Э.Н., Ачкасов Е.Е., Усманова Э.М., Куршев В.В., Султанова О.А., Заборова В.А., Суворов В.Г., Седерхольм Л.А. Применение тромбоцитарных факторов роста при лечении повреждений латеральных связок голеностопного сустава у футболистов. Спортивная медицина: наука и практика 2013; 1: 31-35.
  5. Безуглов Э.Н., Глущенко А.Л., Ачкасов Е.Е., Ядрошвили А.Э., Каркищенко Н.Н. Первый опыт применения тромбоцитарных факторов роста при лечении повреждений опорно-двигательного аппарата спортсменов высокой квалификации. Материалы V Международной конференции по вопросам состояния и перспективам развития медицины в спорте высших достижений СпортМед-2010. М 2010; 53-55.
  6. Брехов В.Л. Хирургическое лечение больных с дефектами костной и хрящевой тканей с применением богатой тромбоцитами аутоплазмы: Автореф. дис. ... канд. мед. наук. Курск 2007.
  7. Войно-Ясенецкий В.Ф. Очерки гнойной хирургии. М: Бином 2006; 720.
  8. Гостищев В.К., Евсеев М.А. Острые гастродуоденальные язвенные кровотечения: от стратегических концепций к лечебной тактике. Сеченовский вестник. Научно-практический рецензируемый журнал ПМГМУ им. И.М. Сеченова 2010; 1: 30-35.
  9. Зинин В.Ю., Кожевников А.М., Зотов В.А. Использование богатой тромбоцитами плазмы в лечении больных с венозными трофическими язвами. Новосибирский государственный медицинский университет 2007.
  10. Сычевский М. Эффективность модифицированной повязки на основе коллагена типа I при лечении обширных ожоговых ран III А степени: Автореф. дис. ... канд. мед. наук. М 2010.
  11. Чекмарева И.А. Процессы репаративной регенерации в ранах при лечении биологически активными перевязочными средствами (экспериментально-морфологическое исследование): Автореф. дис. ... д-ра биол. наук. М 2002.
  12. Anand S.X., Viles-Gonzales J.F., Badimon J.J. et al. Membrane-associated CD40L and sCD40L in atherothrombotic disease. Throm Haemost 2003; 90: 377-384.
  13. Anitua E., Andia I., Ardanza B. et al. Autologous platelets as a source of proteins for healing and tissue regeneration. Tromb Haemost 2004; 91: 4-15.
  14. Batten M.L., Hansen J.C., Dahners L.E. Influence of dosage and timing of application of platelet-derived growth factor on early healing of the rat medial collateral ligament. J Orthop Res 1996; 14: 736-741.
  15. Buckwalter J.A., Mankin H.J. Articular cartilage. Part II: degeneration and osteoarthrosis, repair, regeneration, and tranplantation. J Bone Joint Surg 1997; 79: 612-632.
  16. Chen C.H., Cao Y., Wu Y.F. et al. Tendon healing in vivo: gene expression and production of multiple growth factors in early tendon healing period. J Hand Surg Am 2008; 33: 1834-1842.
  17. Creaney L., Hamilton B. Growth factor delivery methods in the management of sports injuries: the state of play. Br J Sports Med 2008; 42: 314-320.
  18. De Vos R.J., Weir A., van Schie H.T. et al. Platelet-rich plasma injection for chronic Achilles tendinopathy: a randomized controlled trial. JAMA 2010; 13: 303: 144-149.
  19. Eming S.A., Yarmush M.L., Krueger G.G. et al. Regulation of the spatial organization of mesenchymal connective tissue: effects of cell-associated versus released isoforms of platelet-derived growth factor. Am J Pathol 1999; 154: 281-289.
  20. Filardo G., Kon E., Della Villa S. et al. Use of platelet-rich plasma for the treatment of refractory jumper's knee. Int Orthop 2010; 34: 909-915.
  21. Floryan K., Berghoff W.J. Intraoperative use of autologous platelet rich and platelet poor plasma for orthopaedic surgery patients. AORN J 2004; 80: 668-674.
  22. Foster T.E., Puskas B.L., Mandelbaum B.R. et al. Platelet-rich plasma: from basic science to clinical applications. Am J Sports Med 2009; 37: 2259-2272.
  23. Froum S.J., Wallace S.S., Tarnow D.P. et al. Effects of platelet-reach plasma on bone growth and osseоintegration in human maxillary sinus grafts: Three bilateral case reports. Int J Periodontics Restorative Dent 2002; 22: 45-53.
  24. Gugat R. PRP experiences in muscle end tendon injuries: clinical experience with footballers. Football Medicine Strategies for Muscle end Tendon Injuries 2013; 113.
  25. Harrison P., Cramer E.M. Platelet alpha-granules. Blood Rev 1993; 7: 52-62.
  26. Hildebrand K., Woo S., Smith D. et al. The effect of platelet-derived growth factor- BB on healing of the rabbit medial collateral ligament. An in vivo study. Am J Sports Med 1998; 26: 549-554.
  27. Kaetzel D.M., Coyne D.W., Fenstermaker R.A. Transcriptional control of the platelet-derived growth factor subunit genes. Biofac 1993; 4: 2: 71-81.
  28. Kasemkijwattana C., Menetrey J., Bosch P. et al. Use of growth factors to improve muscle healing after strain injury. Clin Orthop Relat Res 2000; 370: 272-285.
  29. Kobayashi M., Itoi E., Minagawa H. et al. Expression of growth factors in the early phase of supraspinatus tendon healing in rabbits. J Shoulder Elbow Surg 2006; 15: 371-377.
  30. Kon E., Buda R., Filardo G. et al. Platelet-rich plasma: intra-articular knee injections produced favorable results on degenerative cartilage lesions. Knee Surg Sports Traumatol Arthrosc 2010; 18: 472-479.
  31. Lee J., Harwood F.L., Akeson W.H. et al. Growth factor expression in healing rabbit medial collateral and anterior cruciate ligaments. Iowa Orthop J 1998; 18: 19-25.
  32. Letson A.K., Dahners L. The effects of combinations of growth factors on ligament healing. Clin Orthop Relat Res 1994; 308: 207-212.
  33. Lind M., Jakobsen B.W., Lund B. et al. Anatomical reconstruction of the medial collateral ligament and posteromedial corner of the knee in patients with chronic medial collateral ligament instability. Am J Sports Med 2009; 37: 1116-1122.
  34. Lopez-Vidriero E., Goulding K.A., Simon D.A. et al. The use of platelet-rich plasma in arthroscopy and sports medicine: optimizing the healing environment. Arthroscopy 2010; 26: 269-278.
  35. Maniscalco P., Gambera D., Lunati A. et al. The "Cascade" membrane: a new PRP device for tendon ruptures. Description and case report on rotator cuff tendon. Acta Biomed 2008; 79: 223-226.
  36. Marx R.E. Platelet-rich plasma: evidence to support its use. J Oral Maxillofac Surgery 2004; 62: 489-496.
  37. Mishra A., Woodall J. Jr., Vieira A. Treatment of tendon and muscle using platelet-rich plasma. Clin Sports Med 2009; 28: 113-125.
  38. Molloy T., Wang Y., Murrell G. The roles of growth factors in tendon and ligament healing. Sports Med 2003; 33: 381-394.
  39. Mustoe T.A., Pierce G.F., Thomason A. et al. Accelerated healing of incisional wounds in rats induced by transforming growth factor-beta. Science 1987; 237: 1333-1336.
  40. Nagumo A., Yasuda K., Numazaki H. et al. Effects of separate application of three growth factors (TGF-beta1, EGF, and PDGF-BB) on mechanical properties of the in situ frozenthawed anterior cruciate ligament. Clin Biomech 2005; 20: 283-290.
  41. Parkkari J., Pasanen K., Mattila V.M. et al. The risk for a cruciate ligament injury of the knee in adolescents and young adults: a population-based cohort study of 46 500 people with a 9 year follow-up. Br J Sports Med 2008; 42: 422-426.
  42. Peerbooms J.C., Sluimer J., Bruijn D.J. et al. Positive effect of an autologous platelet concentrate in lateral epicondylitis in a double-blind randomized controlled trial: platelet rich plasma versus corticosteroid injection with a 1-year followup. Am J Sports Med 2010; 38: 255-262.
  43. Pujol J.P., Chadjichristos C., Legendre F. et al. Interleukin-1 and transforming growth factor-beta 1 as crucial factors in osteoarthritic cartilage metabolism. Connect Tissue Res 2008; 49: 293-297.
  44. Randelli P., Arrigoni P., Cabitza P. et al. Autologous platelet rich plasma for arthroscopic rotator cuff repair. A pilot study. Disabil Rehabil 2008; 30: 1584-1589.
  45. Rubio-Zaragoza M., Damia E., Ceron R. et al. Experimental study on the influence of Intramuscular injection of Plasma Rich Growth Factors in serum Insuline like Growth Factors-I and C-Reactive Protein in the DOG. 15th ESSKA Congress, Geneva, May 2-5, 2012; 35-1192.
  46. Sammut L. Achilles tendinopathy in football players: is there a role for platelet rich plasma injection. Football Medicine Strategies for Muscle end Tendon Injuries 2013; 234.
  47. Sampson S., Gerhardt M., Mandelbaum B. Platelet rich plasma injection grafts for musculoskeletal injuries: a review. Curr Rev Musculoskelet Med 2008; 1: 165-174.
  48. Sаnchez M., Anitua E., Azofra J. et al. Intraarticular injection of an autologous preparation rich in growth factors for the treatment of knee OA: a retrospective cohort study. Clin Exp Rheumatol 2008; 26: 910-913.
  49. Stellos K., Kopf S., Paul A. et al. Platelets in regeneration. Semin Thromb Hemost 2010; 36: 175-184.
  50. Tyapongsak P. et al. Autologius fibrin adhesive in mandibular reconstruction with participate cancellers bone and marrow. J Oral Maxillofacial Surg 1994; 52: 161-166.
  51. Urist M.R., Strates B.S. Bone morphogenetic protein. J Dent Res 1972; 50: 1392.
  52. Virchenko O., Aspenberg P. How can one platelet injection after tendon injury lead to a stronger tendon after 4 weeks? Interplay between early regeneration and mechanical stimulation. Acta Orthop Scand 2006; 77: 806-812.
  53. Westermark B., Siegbahn A., Heldin C. et al. B-type receptor for platelet-derived growth factor mediates a chemotactic response by means of ligand-induced activation of the receptor protein-tyrosine kinase. PNAS 1990; 87: 128-132.
  54. Woo S.L., Smith D.W., Hildebrand K.A. et al. Engineering the healing of the rabbit medial collateral ligament. Med Biol Eng Comput 1998; 36: 359-364.