Эпидемиология урогенитального хламидиоза в России и за рубежом
Урогенитальная хламидийная инфекция (УХИ), вызываемая Chlamydia trachomatis серотипами D—K, — самая распространенная бактериальная инфекция, передаваемая половым путем, (ИППП) во всем мире [1, 2]. Так, например, в 2018 г. общий уровень заболеваемости этой инфекцией в странах Евросоюза составил 406 406 случаев, или 146 случаев на 100 000 населения [3]. При этом показатели заболеваемости остаются стабильно высокими.
Стабильность высокого уровня заболеваемости УХИ может быть связана как с патогенетическими особенностями возбудителя и эпидемического процесса, так и с повышением чувствительности внедряемых тестов, увеличением охвата обследуемых групп населения в рамках скрининговых программ, направленных на профилактику развития осложнений [1, 2, 4–7].
Еще более высокий уровень заболеваемости урогенитальным хламидиозом наблюдается в США, где в 2020 г. зарегистрировано 1 579 885 случаев хламидиоза [8].
В Российской Федерации, в соответствии с данными государственной статистики, показатель заболеваемости УХИ на фоне постоянного снижения значительно меньше показателей в США и европейских странах; относительный показатель заболеваемости в 2020 г. составил 19,4 случая на 100 000 населения (рис. 1) [9].
Рис. 1. Заболеваемость УХИ (число абсолютных случаев) в РФ (2014—2020 гг).
В Москве, согласно данным отчета по форме 089/у-кв, с 2014 г. также наблюдалась тенденция к снижению заболеваемости УХИ, однако в связи с введением в 2018 г. в практику государственных бюджетных учреждений города мультиплексного ПЦР-теста АмплиПрайм-NCMT, позволяющего одномоментно выявлять 3 регистрируемых ИППП — гонококковую, хламидийную и трихомонадную, а также инфекцию, вызываемую M. genitalium, с 2019 г. отмечен рост выявления хламидийной инфекции, что может быть связано с общим улучшением качества лабораторной диагностики и увеличением охвата обследуемого населения, в первую очередь за счет лиц с бессимптомным характером течения инфекции (рис. 2).
Рис. 2. Выявляемость УХИ (число абсолютных случаев) в Москве (2014—2021 гг.).
Проблемы терапии УХИ. Бактериальная нагрузка C. trachomatis. Связь с клиникой и эффективностью терапии
В последние годы в научной литературе появляется все больше данных о важности показателя уровня бактериальной нагрузки, или концентрации возбудителя, в очаге инфекции как патогенетического фактора течения инфекционного процесса [10–15]. Ряд научных исследований свидетельствует о том, что концентрация возбудителя, или бактериальная нагрузка, может быть связана с выраженностью симптомов УХИ, в частности с проявлениями слизисто-гнойного цервицита, тазовой боли при воспалительных заболеваниях органов малого таза, с проявлениями ректальной формы хламидийной инфекции [16–21]. Однако в большинстве работ количественная оценка C. trachomatis проводилась культуральным методом с использованием метода прямой иммунофлуоресценции, что ограничивает применение результатов в широкой практике [22–24]. В связи с изложенным целью исследования явилось изучение связи между величиной бактериальной нагрузки, отраженной в концентрации ДНК C. trachomatis и установленной на основе количественной ПЦР, и клиническими проявлениями инфекции у пациентов, обратившихся за дерматовенерологической помощью.
Материал и методы
Объектом исследования явились 497 пациентов обоего пола с установленной неосложненной УХИ, находившиеся под наблюдением в МНПЦДК в 2021 г. Выборка включала 398 (80,1%) мужчин и 99 (19,9%) женщин в возрасте от 16 до 68 лет.
Материалом для лабораторного исследования служили соскобы/отделяемое со слизистой оболочки органов урогенитального тракта пациентов (у мужчины отделяемое уретры, у женщин отделяемое влагалища и цервикального канала). Забор биоматериала осуществляли с помощью одноразовых стерильных зондов-тампонов в одноразовые полипропиленовые пробирки с транспортной средой с муколитиком, которые хранились при комнатной температуре не более 2 ч, а в случае необходимости более длительного хранения помещались в холодильник с температурой 2–8˚C на срок не более 1 сут.
В образцах биологического материала определяли наличие и концентрацию ДНК C. trachomatis, а также N. gonorrhoeae, M. genitalium и T. vaginalis методом мультиплексной ПЦР в режиме реального времени с использованием набора реагентов АмплиПрайм NCMT (РУ №РЗН 2015/3168 от 13.10.2015, ООО «НекстБио», Москва, Россия). Для экстракции ДНК применен набор МагноПрайм ФАСТ (ООО «НекстБио», Россия). Исследования проведены согласно инструкциям к наборам реагентов. Бактериальную нагрузку C. trachomatis условно определяли как «условно низкую» при концентрации возбудителя в пробе биоматериала 104 ГЭ /мл и ниже и как «условно высокую» при концентрации выше 104 ГЭ /мл. Расчет концентрации ДНК C. trachomatis проводили с помощью программного обеспечения FRT Manager (РУ №РЗН 2019/8870 «ООО ИнтерЛабСервис»).
Статистическую обработку данных осуществляли с использованием ПО Excel (пакет MS Office). Для анализа 4-польных таблиц сопряженности (сравнение процентных долей в группах), подсчета критерия χ2 (Хи-квадрат), коэффициента сопряженности Пирсона (С), отношения рисков (OR) и критерия Фишера (F) применяли онлайн калькулятор [25].
Результаты и обсуждение
При использовании мультиплексного ПЦР-теста АмплиПрайм NCMT у 92 (18,5%) пациентов выявлена сочетанная инфекция, в том числе C. trachomatis + N. gonorrhoeae у 77 (83,7% лиц с коинфекцией), C. trachomatis + M. genitalium у 11 (11,9%), C. trachomatis + T. vaginalis у 1 (1,0%), C. trachomatis + M. Genitalium + N. gonorrhoeae у 3 (3,4%) (рис. 3).
Рис. 3. Частота коинфекции C. trachomatis у больных УХИ с другими возбудителями ИППП.
Определение бактериальной нагрузки C. trachomatis в биологическом материале пациентов показало следующее. Концентрация ДНК C. trachomatis 104 ГЭ/мл и ниже выявлена у 312 (62,8%) пациентов, более 104 ГЭ/мл — у 185 (37,2%). Условно низкая концентрация ДНК C. trachomatis выявлена у 240 (60,3%) мужчин и 72 (72,8%) женщин, условно высокая — у 158 (39,7%) мужчин и 27 (27,2%) женщин. Таким образом, среди больных УРИ преобладали пациенты с низкой концентрацией ДНК C. trachomatis как среди мужчин, так и среди женщин (рис. 4).
Рис. 4. Результаты определения концентрации (бактериальной нагрузки) C. trachomatis в биологическом материале мужчин и женщин с неосложненной хламидийной инфекцией.
При сравнении полученных данных проанализирована взаимосвязь клинических проявлений инфекции, обусловленной C. trachomatis, и бактериальной нагрузки возбудителя.
У 118 (75%) мужчин с высокой бактериальной нагрузкой отмечены выраженные клинические симптомы заболевания: дискомфорт в области гениталий (зуд, жжение, болезненность в уретре), выделения (слизисто-гнойные, гнойные) из уретры, дизурия (резь в мочевом пузыре и уретре, учащенное, иногда болезненное мочеиспускание) и гематурия; выраженных клинических проявлений не установлено соответственно у 40 (25,0%) пациентов.
Только у 70 (29,0%) из 240 пациентов с низкой бактериальной нагрузкой выявлены вышеперечисленные симптомы, тогда как остальные 170 (71,0%) пациентов таких симптомов не имели и обращались к врачу при диспансеризации, а также при медицинском обследовании как половые партнеры.
Подсчет достоверности полученных различий с использованием 4-польной таблицы и определением критерия χ2 у мужчин установил достоверную связь между наличием клинических проявлений и величиной бактериальной нагрузки C. trachomatis (критерий Хи-квадрат χ2=42,39; p<0,001; C=0,418 (относительно сильная связь); OR 7,34; F=0,000000 (рис. 5).
Рис. 5. Распределение частоты встречаемости клинических симптомов у мужчин и женщин с высокой и низкой бактериальной нагрузкой C. Trachomatis.
Сравнение частоты встречаемости различных клинических симптомов заболевания у мужчин показало наличие достоверных различий по всем симптомам у пациентов с высокой и низкой бактериальной нагрузкой C. trachomatis (рис. 6). Дискомфорт в области гениталий (зуд, жжение, болезненность в области уретры) наблюдали у 89 мужчин с высокой (75,4% лиц с высокой нагрузкой) и у 70 мужчин с низкой бактериальной нагрузкой (29,0% лиц с низкой нагрузкой) (критерий Хи-квадрат χ2=42,39; p<0,001; C=0,418 (относительно сильная связь); OR 7,34; F=0,000000). Выделения из уретры зарегистрированы у 87 (73,7%) мужчин с высокой и у 70 (29,0%) мужчин с низкой бактериальной нагрузкой (критерий Хи-квадрат ξ2=40,54; p<0,001; C=0,411 (относительно сильная связь); OR 6,97; F=0,000000); дизурия (резь в мочевом пузыре и уретре, учащенное, иногда болезненное мочеиспускание) отмечена у 85 (72,0%) пациентов с высокой и у 65 (24,1%) пациентов с низкой бактериальной нагрузкой (критерий Хи-квадрат ξ2=46,15; p<0,001; C=0,433 (относительно сильная связь); OR 8,14; F=0,000000). Гематурия выявлена у 15 (12,7%) пациентов с высокой и у 2 (0,8%) пациентов с низкой бактериальной нагрузкой (критерий Хи-квадрат ξ2=11,06; p<0,001; С=0,229 (средняя связь); OR 14,79; F=0,001280).
Рис. 6. Частота выявления клинических симптомов у мужчин с высокой и низкой бактериальной нагрузкой.
Среди женщин прослеживалась менее выраженная зависимость. Высокая бактериальная нагрузка C. trachomatis наблюдалась, как правило, у пациенток, обратившихся с жалобами (вагинальные выделения, посткоитальные кровотечения, боль в животе). При этом из 27 женщин с высокой бактериальной нагрузкой выраженные клинические проявления зарегистрированы у 13 (48%); выраженных клинических проявлений не отмечено у 14 (52%) пациенток.
В 72 из 99 положительных образцов определялась низкая бактериальная нагрузка C. trachomatis, при этом у 40 (56,0%) пациенток не было ярко выраженной клинической симптоматики, соответственно такую симптоматику имели 32 (44,0%) женщины.
Подсчет достоверности полученных различий с использованием 4-польной таблицы и определением критерия χ2 у женщин показал отсутствие связи между наличием клинических проявлений и величиной бактериальной нагрузки C. trachomatis (критерий Хи-квадрат, χ2=0,32; p=0,571; C=0,057 (несущественная связь); OR 1,17; F=0,670492) (см. рис. 5).
Сравнение частот встречаемости различных клинических симптомов заболевания у женщин показало отсутствие достоверных различий между частотой встречаемости симптомов у пациенток с высокой и низкой бактериальной нагрузкой C. trachomatis (рис. 7).
Рис. 7. Частота выявления клинических симптомов у женщин с высокой и низкой бактериальной нагрузкой.
Так, дискомфорт в области гениталий наблюдали у 13 (48,0%) пациенток с высокой и у 32 (44,0%) пациенток с низкой бактериальной нагрузкой (критерий Хи-квадрат χ2=0,32; p=0,57; C=0,04 (несущественная связь); OR 1,17; F=0,670492); вагинальные выделения зарегистрированы у 12 (44,4%) пациенток с высокой и у 30 (41,7%) пациенток с низкой бактериальной нагрузкой (критерий Хи-квадрат ξ2=0,082; p=0,776; C=0,020 (несущественная связь); OR 1,09; F=0,886477); дизурия отмечена у 12 (44,4%) женщин с высокой и у 30 (41,7%) женщин с низкой бактериальной нагрузкой (критерий Хи-квадрат ξ2=0,08; p=0,776; C=0,020 (несущественная связь); OR 1,09; F=0,886477); посткоитальные кровотечения выявлены у 1 (3,7%) женщины с высокой и у 4 (5,6%) женщин с низкой бактериальной нагрузкой (критерий Хи-квадрат χ2=0,42; p=0,517; C=0,046 (несущественная связь); OR 0,65; F=0,747529), боль в животе зарегистрирована у 4 (14,8%) женщин с высокой и у 10 (13,9%) женщин с низкой бактериальной нагрузкой (критерий Хи-квадрат χ2=0,04; p=0,841; C=0,014 (несущественная связь); OR 1,08; F=1,000000).
Подсчет достоверности полученных различий с использованием 4-польной таблицы и определением критерия критерий Хи-квадрат у лиц обоего пола показал связь между наличием клинических проявлений и величиной бактериальной нагрузки C. trachomatis (значение критерия Хи-квадрат, χ2=28,93; p<0,001; C=0,355 (средняя связь); нормированное значение коэффициента Пирсона (C’) 0,503 (относительно сильная связь); OR 4,97; F=0,000000).
Таким образом, группе пациентов-мужчин, а также в общей группе пациентов, где преобладали мужчины, определялась достоверная прямая связь между наличием клинических проявлений заболевания и величиной бактериальной нагрузки возбудителя. Вероятным объяснением данного феномена может являться то, что более высокая бактериальная нагрузка C. trachomatis в уретре у мужчин может вызвать более выраженную реакцию воспаления, связанную, в частности, с синтезом провоспалительных цитокинов и хемокинов, провоцируемым внутриклеточным проникновением C. trachomatis [26, 27]. Отсутствие достоверной связи между этими показателями у женщин является дополнительным свидетельством различий в патогенезе хламидийной инфекции по сравнению с мужчинами, меньшей реактивности местного звена иммунитета, что на популяционном уровне выражается более высокой частотой бессимптомно протекающей хламидийной инфекции [28].
Как показывают результаты исследования, величина бактериальной нагрузки C. trachomatis в урогенитальном тракте пациентов может влиять на характер клинического течения хламидиоза среди пациентов-мужчин. При этом женщины в первую очередь с высокой бактериальной нагрузкой возбудителя и бессимптомным течением заболевания являются резервуаром инфекции и способствуют ее распространению. Определение величины бактериальной нагрузки C. trachomatis должно учитываться как в оценке клинической картины заболевания, так и при назначении этиотропной терапии.
Выводы
1. Среди пациентов с неосложненной урогенитальной хламидийной инфекцией преобладают (62,8%) пациенты с условно низкой бактериальной нагрузкой C. trachomatis в урогенитальном тракте, определяемой до лечения, как среди мужчин, так и среди женщин.
2. Отмечена достоверная прямая связь между величиной бактериальной нагрузки C. trachomatis и наличием клинических признаков заболевания среди пациентов-мужчин (OR 7,34; p<0,001), а также в общей группе пациентов, где преобладали мужчины (OR 4,97; p<0,001). Среди пациентов-женщин подобной зависимости не выявлено (OR 1,17; p=0,57), что могло быть обусловлено малым объемом выборки пациентов и преобладанием женщин с бессимптомно протекающей инфекцией.
3. Величину бактериальной нагрузки C. trachomatis рекомендуется учитывать при оценке клинической картины заболевания.
Участие авторов:
Концепция и дизайн исследования — Гущин А.Е., Потекаев Н.Н.
Сбор материала и статистическая обработка — Негашева Е.С., Полевщикова С.А., Сенина М.Е.
Написание текста, анализ данных — Фриго Н.В., Негашева Е.С.
Редактирование — Доля О.В.
Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.
Authors’ contributions:
The concept and design of the study — Gushchin A.E., Potekaev N.N.
Collecting the data — Negasheva E.S., Senina M.E., Polevshchikova S.A.
Drafting the manuscript, data analysis — Negasheva E.S., Frigo N.V.
Revising the manuscript — Dolya O.V