Бруцеллез — зоонозное заболевание, вызываемое бактериями рода Brucella. В Российской Федерации для профилактики бруцеллеза у людей используется живая вакцина на основе аттенуированного штамма B. abortus 19BA. Однако выраженная реактогенность и вероятность развития выраженных поствакцинальных реакций после иммунизации делают актуальной задачей создание безопасной субъединичной вакцины. С этой целью нами было создано 47 рекомбинантных бруцеллезных белков и оценена их иммунологическая активность с использованием культуры клеток и сывороток крови мышей линии BALB/c, иммунизированных вакцинным штаммом бруцелл.
ЦЕЛЬ РАБОТЫ
Оценка иммуногенных свойств субъединичных антигенов бруцелл в условиях эксперимента.
МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ
С помощью методов обратной вакцинологии были определены кандидатные бруцеллезные белки, разработана технология их получения и очистки. 47 единичных и слитых рекомбинантных белков были получены в системе E. coli оптимальной концентрации и чистоты для дальнейшего их использования в иммунных анализах. Для оценки иммуногенности рекомбинантных белков бруцелл, мышей линии BALB/c иммунизировали вакцинным штаммом B. abortus 19BA и на 30-е сутки после вакцинации отбирали сыворотку крови и селезенки животных. Белки использовали в качестве специфических индукторов при стимуляции лимфоцитов в экспериментах in vitro и антигенов при определении титров антител в сыворотке крови у иммунных и интактных мышей. Анализ уровня цитокинов ИФН-γ и ИЛ-4 в клеточных супернатантах лимфоцитов, а также титров специфических антител в сыворотке крови проводили методом иммуноферментного анализа.
РЕЗУЛЬТАТЫ
Проведена оценка способности 47 рекомбинантных бруцеллезных белков индуцировать формирование гуморальных и клеточных реакций иммунного ответа в условиях in vitro. В результате был определен 41 белок, активирующий синтез ИФН-γ, и 8 белков, к которым формируются IgG антитела.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
Получены и выявлены бруцеллезные белки, способные индуцировать выраженный иммунный ответ у иммунокомпетентных клеток. Данные белки могут быть рассмотрены в качестве возможных кандидатов на включение в состав векторных, ДНК- и субъединичных вакцин против бруцеллеза у людей.
