Микробный фактор является ведущим в развитии хронического генерализованного пародонтита (ХГП), причем установлено видовое разнообразие микроорганизмов, способствующих развитию заболевания [1, 2]. Дрожжеподобные грибы рода Candida относят к условно-патогенным микроорганизмам, однако они могут влиять на развитие патологического процесса в тканях пародонта у лиц с ХГП [2—5]. Основным биоматериалом для микологического исследования у лиц с ХГП является содержимое пародонтальных карманов (ПК), однако актуально также изучение микобиоты, связанной непосредственно с мягкими тканями пародонта [5, 6]. В доступной нам литературе результаты микологического исследования десневых биоптатов (ДБ) представлены весьма ограниченно [7, 8]. Между тем особенности взаимодействия дрожжеподобных грибов рода Candida с эпителием [3, 6] определяют актуальность микологического исследования ДБ и изучение клинических проявлений ХГП при выявлении дрожжеподобных грибов рода Candida в мягких тканях пародонта.
Цель исследования — установить частоту выявления дрожжеподобных грибов рода Candida в тканях пародонта у пациентов с разными клиническими проявлениями ХГП.
Материал и методы
Обследовали 90 пациентов с ХГП, средний возраст которых составил 53,98±1,06 года. Получено информированное согласие обследуемых лиц на участие в исследовании. На 1-м его этапе были выделены три группы больных: 1-я (n=30) — пациенты с легкой степенью ХГП, 2-я (n=30) — с ХГП средней степени тяжести и 3-я (n=30) — с ХГП тяжелой степени. На 2-м этапе исследования выделили две группы больных в зависимости от наличия Candida spp. в Д.Б. Применяли клинические, микробиологические и статистические методы исследования.
Клиническое обследование проводили на базе «Городской клинической стоматологической поликлиники № 1» Омска. Определяли особенности клинических проявлений ХГП: шелушение красной каймы губ, отечность языка, гиперемию слизистой оболочки рта (СОР), наличие пенистой слюны, трещин в углах рта, налета на языке, поскольку установлено, что данные признаки характерны для кандида-ассоциированного пародонтита [4]. Оценивали также наличие отечности, кровоточивости, гиперемии десен, цианотичного оттенка десен, их гипертрофии, гноетечения из П.К. Устанавливали уровень деструкции костной ткани межзубных перегородок по результатам конусно-лучевой компьютерной томографии и ортопантомографии, глубину ПК, патологическую подвижность зубов, индекс КПУ, наличие и вид протезов. Выявляли налет-ретенционные факторы (некачественные пломбы, протезы), неудовлетворительную гигиену полости рта (индекс Силнесс—Лоу >0,5 балла). Для микологического исследования у каждого обследуемого (n=90) брали содержимое ПК и Д.Б. Содержимое П.К. брали в наиболее глубоком его участке стерильными бумажными штифтами. Забор Д.Б. не являлся травмирующей процедурой, поскольку удаление инфицированного эпителия, подлежащих мягких тканей пародонта, грануляций — часть лечебных мероприятий. Биоматериал из ПК и ДБ погружали в отдельные стерильные тубферы с транспортной тиогликолевой средой. Подготовку Д.Б. проводили по запатентованной нами методике [7]. Дрожжеподобные грибы рода Candida выделяли на среде Сабуро, для их селективной изоляции использовали среду CandiSelect 4 («BioRad», Франция), для видовой идентификации Candida — колориметрический тест Auxacolor 2 («BioRad», Франция). Обсемененность биоматериалов выражали через десятичный логарифм величины выросших колоний в колониеобразующих единицах (lg КОЕ/мл).
Статистическая обработка данных осуществлялась с помощью статистической программы Bio Stat 2009. Полученные данные представлены как среднее и стандартная ошибка среднего (M±SE). При сравнении количественных результатов применяли тест ранговых знаков Wilcoxon, Н-критерий Kruskal—Wallis и U-критерий Манна—Уитни, при сравнении качественных данных — критерий χ2 с поправкой Йетса. За уровень статистической значимости принимали р<0,05.
Результаты и обсуждение
У всех обследованных (n=90) выявляли признаки, характерные для кандида-ассоциированного пародон-тита [4]: шелушение красной каймы губ (30% случаев), отечность языка (31,1%), гиперемию СОР (25,6%), пенистую слюну (20%), трещины в углах рта (21,1%), налет на языке (31,1%). Наиболее часто у обследованных наблюдали неудовлетворительную гигиену полости рта (96,7%), кровоточивость десен (95,6%), их отечность (75,6%), гиперемию десен в области всех зубов (63,3%), глубину ПК до 5 мм (71,1%), деструкцию костной ткани межзубных перегородок до ½ длины корня (74,4%). Устанавливали также наличие налет-ретенционных факторов (57,8% случаев), съемных протезов (51,1%), гипертрофии десен (50%), гноетечения из ПК (47,8%), несъемных протезов (41,1%). Индекс КПУ <9 выявлен у 44,4% пациентов, а КПУ >9 — у 55,6%. Цианотичный оттенок десен обнаружен у 35,6% больных, глубина ПК >5 мм — у 28,9%, подвижность зубов — у 25,6%, деструкция костной ткани межзубных перегородок более ½ длины корня — у 25,6%. Оценивали частоту встречаемости указанных клинических проявлений в зависимости от наличия Candida spp. в биотопе ПК.
С целью выбора оптимального биоматериала для микологического исследования на 1-м этапе исследования сравнивали частоту выявления и количественную обсемененность дрожжеподобными грибами рода Candida содержимого ПК и ДБ в зависимости от степени тяжести ХГП в трех группах пациентов (табл. 1).
Установлена большая частота выявления Candida spp. в ДБ у лиц с ХГП тяжелой степени (3-я группа), чем с легкой (1-я группа; χ2=5,50; р=0,0190). Немаловажно, что при исследовании содержимого ПК данной тенденции не наблюдалось (χ2=1,08; р=0,2993). Установлено, что в 3-й группе у лиц с ХГП тяжелой степени количество Candida spp. в ДБ значимо превышало таковое в ПК (Т=29,5; Z=3,44; р=0,0006). При этом отсутствие различий количества дрожжеподобных грибов рода Candida spp. в ПК и ДБ у лиц с ХГП легкой степени (1-я группа; р=0,2146) и средней (2-я группа; р=0,4326) могло свидетельствовать об их способности к связи с мягкими тканями пародонта. При прогрессировании ХГП количество Candida spp. в ДБ увеличивалось с 0,8±0,18 lg КОЕ/мл при ХГП легкой степени (1-я группа) до 3,6±0,49 lg КОЕ/мл при тяжелом пародонтите (3-я группа; Н=18,8; р=0,0003), но содержимого ПК данная тенденция не касалась (р=0,7344; Н=0,7415). Таким образом, частота выявления и количество дрожжеподобных грибов рода Candida в ДБ отличалось от таковых в ПК.
Клиническое состояние органов и тканей полости рта оценивали в зависимости от выявления Candida spp.в Д.Б. Как уже говорилось, на данном этапе исследования были выделены две группы пациентов (табл. 2).
При наличии Candida spp. в ДБ статистически значимо чаще, чем при отсутствии микобиоты, выявляли налет на языке и отечность языка (в 44,9% случаев), шелушение красной каймы губ (в 43,9% случаев) и гиперемию СОР (в 36,7% случаев), что подтверждает имеющиеся сведения [4]. Однако установлено, что при выявлении Candida spp. в ДБ также чаще наблюдали цианотичный оттенок десен, свидетельствующий о застойных явлениях в тканях пародонта (у 51% пациентов), глубину ПК >5 мм (у 42,9%) и деструкцию костной ткани межзубных перегородок более ½ длины корня (у 36,7%). Наличие Candida spp. в ДБ не влияло на частоту встречаемости гиперемии десен (χ2=2,32; р=0,1279), их отечности (χ2=3,01; р=0,0829), кровоточивости (χ2=3,01; р=0,0828), гипертрофии (χ2=2,87; р=0,0904), гноетечения из ПК (χ2=0,15; р=0,0699), подвижности зубов (χ2=3,73; р=0,0536), глубины ПК до 5 мм (χ2=1,20; р=0,2736), трещин углов рта (χ2=2,68; р=0,1017), пенистой слюны (χ2=0,14; р=0,7111), съемных протезов (χ2=1,08; р=0,2985), несъемных протезов (χ2=0,02; р=0,8784), налет-ретенционных факторов (χ2=0; р=0,9554), неудовлетворительной гигиены рта (χ2=0,02; р=0,8751), индекса КПУ <9 (χ2=0,3; р=0,5863) и индекса КПУ >9 (χ2=0,01; р=0,9058).
Таким образом, установлены различия в частоте выявления и количестве Candida spp. в ДБ в зависимости от содержимого ПК, а также более частое обнаружение ряда клинических признаков у лиц с ХГП при наличии Candida spp. в ДБ, что свидетельствует о значимости микологического исследования ДБ, возможном влиянии микобиоты на особенности клинических проявлений заболевания, а также о необходимости своевременной эрадикации Candida spp. из тканей пародонта [8].
Итак, вышеизложенное позволяет сделать следующие выводы:
— количество дрожжеподобных грибов рода Candida spp. в ДБ у лиц с ХГП тяжелой степени составило 3,6±0,5 lg КОЕ/мл, что значимо больше, чем в ПК — 1,3±0,3 lg КОЕ/ мл. При прогрессировании заболевания повышаются частота выявления Candida spp. в ДБ с 40% у лиц с ХГП легкой степени до 73,3% у лиц с ХГП тяжелой степени и количество Candida spp. — соответственно с 0,8±0,18 до 3,6±0,49 lg КОЕ/мл в отличие от аналогичных показателей содержимого ПК;
— при наличии Candida spp. в ДБ значимо чаще, чем в отсутствие данных микроорганизмов в ДБ, выявляли цианотичный оттенок десен (51% случаев), шелушение красной каймы губ (42,9%), налет на языке (44,9%), отечность языка (44,9%), глубину ПК >5 мм (42,9%), гиперемию СОР (36,7%), деструкцию костной ткани более ½ длины корня (36,7%), что могло быть связано с влиянием Candida spp. на особенности клинических проявлений ХГП.
Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.