Введение

Род клещей Demodex насчитывает около 65 видов паразитов. Они являются видоспецифичными, например, для собак характерны D. canis, для кошек — D. cati, для коров — D. bovis и др. На человеке могут обитать D. folliculorum, D. brevis и D. canis [1]. Морфология клещей характеризуется некоторыми особенностями. Длина самок составляет около 0,40 мм, самцов — 0,16 мм, тело паразитов покрыто хитиновой оболочкой [2]. У взрослых особей выделяют головной отдел, грудь и брюшко [3]. На груди локализуются 4 пары сегментированных ножек, заканчивающихся крючьями. У Demodex круглое ротовое отверстие и колющие хелицеры. Пищеварительная система редуцирована и состоит из хелицер и слаборазвитого просвета среднего кармана без задней кишки и ануса [4, 5].

В развитии Demodex проходит 5 стадий: яйцо, личинка, протонимфа, дейтонимфа и имаго. Через 60 ч после отложения самкой яиц из них образуются личинки, которые, питаясь остатками клеток эпидермиса и кожным салом, в течение 40 ч превращаются в неподвижную протонимфу. Через 72 ч в кожных покровах можно обнаружить подвижную дейтонимфу, а еще через 60 ч — половозрелую особь (имаго), которая живет 14 дней, затем откладывает яйца и погибает [6].

Морфология клещей рода Demodex и локализация их в волосяных фолликулах и сальных железах различных участков кожи изучены недостаточно. Углубленное изучение биологии клещей Demodex является важным для понимания фармакологического действия препаратов.

Цель исследования — изучение внешнего вида клещей Demodex и их локализации в структурах сально-волосяного комплекса человека методами сканирующей электронной и световой микроскопии.

Материал и методы

Внешний вид клеща Demodex изучен на материале, полученном от 5 здоровых мужчин-добровольцев в возрасте от 30 до 40 лет. Для этого с помощью скальпеля с кожи лица проводили соскоб содержимого сально-волосяных комплексов. Под микроскопом выделяли взрослых особей клещей и обездвиживали в 10% растворе NaOH, обезвоживали в 70 и 96% растворе спирта. После этого фиксировали в спиртовом растворе Камфена восходящей концентрации. Материалы исследовали методом сканирующей электронной микроскопии с компьютерной цветокоррекцией на аппарате Hitachi S-3400N (Япония).

Для изучения локализации паразитов в коже исследование проводили на биоптатах 33 мужчин в возрасте от 26 до 74 лет, причиной смерти которых являлись острая сердечная недостаточность в сочетании с атеросклеротической болезнью сердца или кардиомиопатией, острое отравление алкоголем или наркотическими веществами, пневмония и травмы, несовместимые с жизнью. Взятие материала с кожи носогубной складки (столбик тканей размером 8 мм) осуществляли через 12–15 ч после смерти методом панч-биопсии. Материал фиксировали в 10% нейтральном формалине. Срезы получали по стандартной методике и окрашивали по методам Ван Гизона и Маллори. Для просмотра материала использовали микроскоп Axioskop 2, камеру AxioCam и программное обеспечение AxioVision (Carl Zeiss, Германия).

Результаты и обсуждение

При изучении внешнего вида клещей Demodex с помощью метода сканирующей электронной микроскопии получены четкие изображения основных частей тела взрослых особей (имаго): головного и грудного отделов, ротового аппарата и конечностей (рис. 1).

Рис. 1. Микрофотографии клеща Demodex на стадии имаго, полученные методом сканирующей электронной микроскопии с последующей цветокоррекцией (аппарат Hitachi S-3400N; ×750, ×1900).

а: 1 — брюшко (опистосома), 2 — грудь (подосома), 3 — головной конец (гнатосома); б: 4 — конечности, 5 — ротовой аппарат.

При исследовании мест локализации паразитов в структурах сально-волосяных комплексов методом световой микроскопии остатки клещей найдены в устье волосяного влагалища фолликулов, их просвете, толще эпителиальной выстилки, а также в выводных протоках сальных желез и среди себоцитов (рис. 2–4).

Рис. 2. Локализация клещей Demodex (в овалах) в структурах сально-волосяного комплекса (окраска по Ван Гизону; ×100, ×200).

а — в устье волосяного влагалища, б — в дольке сальной железы, в — в толще эпителия сально-волосяного комплекса.

Рис. 3. Локализация клещей Demodex (в овалах) в структурах сально-волосяного комплекса (окраска по Маллори; ×100).

а — в выводном протоке сальной железы, б — в дольке сальной железы, в — в толще эпителия волосяного влагалища.

Рис. 4. Схема локализации клещей Demodex в сально-волосяном комплексе.

Результаты, полученные на биопсийном материале с использованием сканирующей и световой микроскопии, подтверждают и дополняют имеющиеся в литературе сведения об особенностях морфологии и локализации клещей Demodex in vivo [5, 7—10] и представляют интерес для исследовательских групп, занимающихся разработкой и изучением фармакологического действия противопаразитарных препаратов.

Участие авторов:

Пустовая К.Н. — взятие и подготовка материалов к сканирующей электронной микроскопии, текст работы.

Аванесова Н.И. — изготовление гистологических препаратов.

Жук Ю.М. — получение секционного материала.

Сморчков М.М. — проведение сканирующей электронной микроскопии.

Ноздрин В.И. — дизайн исследования, научное редактирование работы.

Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.

Жук Ю.М. являлась сотрудником ГБУЗ Москвы «Бюро судебно-медицинской экспертизы Департамента здравоохранения Москвы» с 2007 по 2016 г.

Остальные авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.

Работа утверждена Комиссией по этике АО «Ретиноиды» (протокол №1 от 28.08.20).