Рассеянный склероз (РС) — это хроническое аутоиммунное заболевание, которое характеризуется развитием воспаления, потерей миелина и последующим аксональным повреждением центральной нервной системы (ЦНС) [1]. Пpинятo считaть, чтo возникновение и развитие заболевания обусловлено сочетанием средовых и генетических факторов.

Существование семейных случаев РС свидетельствует о наследственной природе заболевания. Первые упоминания о семейных формах РС встречаются в конце XIX века в работах Ж. Шарко. В середине XX века J. Kurtzke [2] выделил среди пациентов с РС группу с отягощенным семейным анамнезом. Случай Р.С. определялся как семейный при наличии у пациента как минимум одного родственника любой степени с данным заболеванием. Семейные варианты заболевания составляют от 2 до 5% всех случаев [3]. На развитие семейной формы РС в значительной мере могут влиять и общие для членов семьи факторы среды (наличие инфекционного агента, особенности питания и пр.), тем более что при семейных случаях РС заболевают чаще всего представители одного поколения. В то же время роль наследственных факторов подтверждают результаты исследований частоты возникновения заболевания у приемных детей пациентов с Р.С. Риск развития заболевания у таких детей значительно меньше, чем у родных детей больных РС, и практически равен риску РС в популяции [4]. Результаты исследований с использованием близнецового метода также свидетельствуют о значительной роли генетических факторов в развитии Р.С. Величина относительного риска заболевания для родственников больных РС в 20—50 раз, а для монозиготных близнецов в 300 раз превышает среднепопуляционный риск [5—7]. Конкордантность по РС у монозиготных близнецов выше, чем у дизиготных (25—30% по сравнению с 3%), в то время как для дизиготных близнецов риск развития РС лишь незначительно превосходит таковой у обычных сибсов [8, 9]. В ряде работ было продемонстрировано систематическое снижение относительного риска при увеличении генетической дистанции по отношению к пробанду [9, 10].

К настоящему времени нет убедительных данных о клинических различиях семейных и спорадических случаев РС ни по времени дебюта, ни по длительности первой ремиссии, ни по скорости прогрессирования заболевания [11—13]. Отмечается более ранний дебют РС у пациентов с семейными случаями, а также у родственников младших поколений [11—14]. В то же время сходное клиническое течение заболевания прослеживается у родных братьев и сестер, но не у родителей и детей [11]. Общепризнанно, что женщины страдают РС приблизительно в 2 раза чаще, чем мужчины, а при семейных случаях преобладание среди заболевших женщин еще более значительное (в 5—6 раз) [15]. Результаты, полученные в крупном исследовании популяции канадцев, также свидетельствуют о повышенной (в 3,8 раза) частоте передачи РС по материнской линии, что подтверждается сравнениями частот заболеваемости РС у полусибсов по отцу и по матери, а также у родственников второй степени [16—18]. Феномен передачи по материнской линии объясняется взаимодействием предрасполагающих генетических особенностей с факторами, влияющими на организм во время внутриутробного развития, а также материнским эффектом цитоплазмы в результате эпигеномных модификаций [19].

Передача РС по отцовской линии обнаруживается реже [20]. Это объясняют эффектом Картера, который проявляется в том, что у потомков пробандов редко поражаемого пола чаще развивается наследственно обусловленное заболевание вследствие их более высокой генетической отягощенности аллелями риска [21]. Подтверждением возможного влияния эффекта Картера можно считать повышение риска развития РС у сыновей отцов, страдающих этим заболеванием, по сравнению с сыновьями матерей с РС [22]. Встречаются также упоминания о равных рисках развития заболевания у лиц с отягощенной наследственностью по материнской и отцовской линии [22, 23].

В настоящее время актуальным является поиск генов-кандидатов, связанных с развитием семейных случаев Р.С. Пока отсутствуют достоверные сведения о различии генетических основ семейных и спорадических форм Р.С. Результаты анализа ассоциаций с РС полиморфных вариантов генов IL2RA и IL7RA с учетом наследственной отягощенности в популяции канадцев позволили сделать предположение о неоднородности эффектов исследуемых SNP при семейных и спорадических случаях заболевания [24]. Многообещающим подходом при изучении генетических особенностей семейных случаев РС является метод «генетической нагрузки» («genetic burden»), позволяющий оценить совместный вклад нескольких генетических маркеров, расположенных на одной или разных хромосомах, в формирование предрасположенности к заболеванию. Результаты подобных исследований подтверждают накопление отдельных аллелей риска. В частности, была обнаружена агрегация ассоциированных с развитием РС генотипов полиморфных локусов генов IL2RA, IL7R, CD58, EVI5, KIAA0350 в семьях с множественными случаями РС [25]. В другом исследовании при анализе полиморфных вариантов в 16 генах была также продемонстрирована более высокая встречаемость маркеров предрасположенности к РС у пациентов с наследственной отягощенностью [26].

Изучение семейных форм РС в Республике Башкортостан (РБ) проводится с 2000 г. В 2006 г. было установлено, что 27 из зарегистрированных на тот момент 640 пациентов с РС имели одного родственника и более, страдающего этим заболеванием. Семейный риск повторяемости заболевания составил 2,6%, общий риск повторяемости РС — 4,2% [27]. К 2014 г. общая численность пациентов в регистре Республиканского центра рассеянного склероза (РЦРС) достигла 1145 человек, из них лиц с отягощенной наследственностью по РС — 70 человек в 48 семьях, семейный риск повторяемости — 4,3%, общий риск повторяемости РС — 6,5%. Ранее было показано, что при увеличении времени наблюдения за семьями пациентов с РС (до 35 лет) семейный риск повторяемости может увеличиться до 36% [28]. Аналогичная тенденция прослеживается при анализе семейных случаев РС в РБ.

В настоящем исследовании представлен редкий случай семейной формы РС в регионе — семья русских, в которой заболеванием поражены 6 родственников в разных поколениях.

Цель работы — изучение клинических особенностей течения и поиск полиморфных маркеров генов риска развития РС в семье с несколькими случаями рассеянного склероза.

Исследование выполнено в соответствии с этическими принципами проведения медицинских исследований с участием человека в качестве субъекта, закрепленными в Хельсинкской декларации (2013), письменное информированное добровольное согласие было получено от всех участников.

Группа пациентов была отобрана из числа лиц, состоящих на учете в РЦРС. Диагноз Р.С. устанавливался согласно критериям МакДоналда (2010).

ДНК выделяли стандартным методом фенольно-хлороформной экстракции из 4 мл цельной венозной крови [29]. Для молекулярно-генетического анализа были доступны образцы ДНК всех 6 страдающих РС членов семьи, за исключением прабабушки. Генотипирование проводили с использованием полимеразной цепной реакции (ПЦР) или ПЦР с анализом полиморфизма длин рестрикционных фрагментов (ПДРФ). Олигонуклеотидные праймеры подбирали с использованием пакета программ DNAStar v. 5.05 и базы данных NCBI (http://www.ncbi.nlm.nih.gov/SNP). Перечень маркеров, последовательности праймеров, рестриктазы, амплифицируемые фрагменты представлены в табл. 1. Полученные в результате амплификации и рестрикции фрагменты разделяли при помощи электрофореза в 7% полиакриламидном или 2% агарозном геле и идентифицировали с помощью видеогельдокументирующей системы Mega-Bioprint 1100 («Vilber Lourmat», Франция).

Статистическую обработку полученных данных проводили с использованием пакета компьютерных программ IBM SPSS Statistics 21.0. Относительный риск заболевания у носителей определенного аллеля или генотипа вычисляли как показатель соотношения шансов (OR).

Наблюдение членов семьи, страдающих РС, из которых у 2 достоверный диагноз заболевания был установлен впервые, ведется в РЦРС с 2000 г. Были проведены тщательный сбор анамнеза и изучение медицинской документации, что позволило составить родословную (см. рисунок).

Пробанд (IV-1), 1981 года рождения. На момент осмотра (декабрь 2015 г.) предъявлял жалобы на общую слабость и быструю утомляемость. В 2006 г. его в течение 2 нед беспокоила слабость в ногах, которая прошла без лечения. В 2009 г. появились сильное головокружение, рвота, онемение левой половины лица. На МРТ головного мозга были выявлены множественные зоны патологического МР-сигнала в белом веществе больших полушарий мозга перивентрикулярной локализации, из которых несколько накапливали контраст. Пациенту был установлен диагноз РС в стадии обострения. Оценка выраженности неврологического дефицита по шкале EDSS составила 3 балла. Полный регресс неврологической симптоматики наступил после пульс-терапии глюкокортикостероидами (ГКС). В начале 2010 г. появилось головокружение и двоение в глазах. Симптоматика также регрессировала после пульс-терапии ГКС. С 2010 г. по настоящее время пациент получает препараты, изменяющие течение РС (ПИТРС). Обострений заболевания, а также активности процесса по результатам МРТ зафиксировано не было. Таким образом, в течение 6 лет пациент стабилен на проводимой терапии. В неврологическом статусе выявляются легкая асимметрия лица, оживление сухожильных и периостальных рефлексов, легкая неустойчивость в позе Ромберга при закрытых глазах, интенция при выполнении координационных проб, легкое снижение вибрационной чувствительность в ногах. Билатерально вызывается рефлекс Бабинского. Снижены брюшные рефлексы. Функция тазовых органов не нарушена. Оценка степени тяжести по шкале EDSS составляет 1,5 балла. В общем и биохимическом анализах крови и мочи за время наблюдения за пациентом отклонений выявлено не было.

Мать пробанда (III-2), 1961 года рождения, русская, уроженка Башкортостана. Дебют заболевания произошел в 1989 г. в возрасте 28 лет, при этом отмечались головокружение, шаткость при ходьбе. Диагноз Р.С. установлен в 1990 г. Прогрессирование заболевания началось в 1994 г., через 2 года оценка степени тяжести достигла 6 баллов по шкале EDSS (ходьба с односторонней поддержкой). Способность к самостоятельному передвижению была утрачена в 1998 г. При проведении МРТ головного мозга в 2002 г. выявлены множественные, местами сливающиеся очаги демиелинизации в белом веществе головного мозга, атрофические изменения. Проводилась метаболизирующая и симптоматическая терапия, ПИТРС не получала. С 2004 г. была прикована к постели, потеряв способность к самообслуживанию. Смерть наступила в 2008 г. от интеркуррентной инфекции.

Дядя пробанда (III-3), 1965 года рождения. В 1995 г. в возрасте 30 лет в течение 4 нед отмечал двоение в глазах и одностороннее снижение зрения справа. В 2008 г. появились слабость в ногах, выраженная шаткость при ходьбе и периодическое недержание мочи. На МРТ головного мозга выявлены множественные очаги в белом веществе головного мозга супра- и интратенториальной локализации, один очаг в шейном отделе спинного мозга. В клинических и биохимических анализах крови и мочи отклонений не выявлено. Был установлен клинически достоверный диагноз Р.С. Симптоматика частично регрессировала после курса пульс-терапии ГКС. Последнее обострение было в 2012 г. С 2012 г. пациент принимает 44 мкг интерферон-бета-1α, на фоне лечения обострений и прогрессирования заболевания не отмечается. В неврологическом статусе выявляются билатеральный горизонтальный нистагм 2-й степени, легкий нижний центральный парапарез, оживление глубоких рефлексов, патологические рефлексы разгибательного типа, неустойчивость в позе Ромберга при открытых глазах, интенция при выполнении координационных проб, умеренное снижение вибрационной чувствительности в ногах, дисфункция тазовых органов (недержание мочи, ежедневные императивные позывы к мочеиспусканию). Передвигается самостоятельно, без поддержки может пройти более 500 м, активен более 12 ч в сутки. Оценка степени тяжести по шкале EDSS составляет 4,5 балла.

Двоюродная тетя пробанда (III-1), 1969 года рождения. Диагноз Р.С. установлен в 1995 г. МРТ головного мозга проведена в 2006 г., выявлены множественные очаги в белом веществе головного мозга супратенториальной локализации, атрофические изменения головного мозга. Оценка степени тяжести по шкале EDSS достигла 6,5 балла в 2009 г. С 2010 г. пациентка проживает в другом регионе, осмотру в настоящее время недоступна. ПИТРС не получала. Имеет сына 1996 года рождения, в настоящее время клинически здорова.

Троюродная тетя пробанда, троюродная сестра матери пробанда, внучка родного брата прабабушки пробанда (III-4), 1959 года рождения. Дебют заболевания произошел в 1997 г. (слабость в правых конечностях, ретробульбарный неврит справа). В анамнезе — черепно-мозговая травма в 1995 г. Наблюдалась с диагнозом «церебральный арахноидит». Прогрессирование заболевания с 2004 г. — центральный умеренный тетрапарез, атактический синдром, дисфункция тазовых органов. В 2007 г. был назначен интерферон-бета-1β (бетаферон), который пациентка принимала в течение года, но прием прекратила из-за выраженного гриппоподобного синдрома. Самостоятельно не передвигается с 2011 г. Проживает в другом регионе с 2011 г., непосредственному осмотру в настоящее время недоступна. В брак не вступала, детей нет.

Прабабушка пробанда (I-1), 1916 года рождения. Имела 5 детей, никто из которых не страдал Р.С. Возраст начала заболевания не известен. Двигательные нарушения (шаткость при ходьбе, слабость в конечностях) отмечались последние 10 лет жизни. Последние 3 мес жизни не могла передвигаться самостоятельно. Диагноз был установлен клинически. Умерла в 1970 г. в возрасте 54 лет. Причина смерти точно не известна, предположительно — интеркуррентная инфекция. Бабушка пробанда (II-3) умерла в 2009 г. от острого инфаркта миокарда, информацией о двух ее братьях, сестре и их потомках родственники не располагают.

Клинические особенности течения РС в изучаемой семье представлены в табл. 2 и иллюстрируют описанные в литературе наиболее часто встречающиеся закономерности, такие как передача заболевания по материнской линии, более ранний дебют и доброкачественное течение у представителей младших поколений. Отмечается внутрисемейный клинический полиморфизм заболевания, в частности различные симптомы дебюта Р.С. Отсутствие клинических обострений и прогрессирования заболевания, а также активных очагов по данным МРТ у пробанда обусловлено, вероятно, своевременным назначением иммуномодулирующей терапии.

Семейные случаи РС, при которых заболеванием поражаются пять и более членов, встречаются редко. Сообщалось о семье, в которой РС страдали 15 членов в четырех поколениях. Результаты генетического картирования членов этой семьи по гену HLA-DRB1 не выявили сцепления данного локуса с заболеванием, однако позволили установить, что аллель DRB1*15 встречался с повышенной частотой у членов семьи, страдавших РС (79% против 38% у здоровых членов семьи и 30% в общей популяции) [30]. Проведение впоследствии анализа сцепления 681 микросателлитного маркера у 82 членов этой семьи не привело к обнаружению каких-либо иных генов, связанных с развитием заболевания [31]. Секвенирование экзона четырех членов этой семьи позволило идентифицировать полиморфизм rs5576244 (миссенс-мутация в экзоне 3 гена TYK2), ассоциированный с повышенным риском РС [32].

В настоящем исследовании для анализа были отобраны функционально значимые полиморфные варианты, расположенные в кодирующих или регуляторных областях генов, продукты которых вовлечены в патогенез РС (TYK2 — ген тирозинкиназы 2, GPC5 — ген глипикана 5, JAK2 — ген янус-киназы 2, STAT3 — ген сигнального белка-трансдуктора и активатора транскрипции 3, NFKB1 — ген ядерного транскрипционного фактора кB, IL7R — ген альфа-цепи рецептора интерлейкина-7, IL2RA — ген альфа-цепи рецептора интерлейкина-2, IL2 — ген интерлейкина-2), а также полиморфных маркеров, для которых была выявлена ассоциация с РС в результате проведенных ранее GWAS (rs1109670, локализованный в промежутке между генами DDEF2 (ASAP2) и MBOAT2, и rs3129934, принадлежащий к участку C6orf10 в области главного комплекса гистосовместимости HLA-DRB1) (см. табл. 1).

В табл. 3 представлены генотипы изученных полиморфных локусов в данной семье. У троих членов изученной нами семьи выявлен генотип T/T полиморфного варианта rs1570538 гена IL2RA, известного ранее как CD25. Известно, что взаимодействие IL2/IL2RA (CD25) играет важную роль в регуляции иммунного ответа. Содержание растворимой формы IL2RA (sIL2RA) повышено в сыворотке крови больных аутоиммунными и воспалительными заболеваниями [33]. В исследовании F. Matesanz и соавт. [34] было обнаружено, что генотип T/T полиморфного варианта rs1570538 ассоциирован с РС в популяции испанцев (n=759). Поскольку rs1570538 расположен в некодирующей области на 3᾿-конце, было высказано предположение, что он может оказывать влияние на уровень экспрессии гена IL2RA и, следовательно, на количество регуляторных Т-лимфоцитов, способствуя развитию аутоиммунной реакции против миелина и других компонентов нейронов, что влияет на прогрессирование и тяжесть заболевания. В расширенной выборке (n=1725) были подтверждены первоначально полученные результаты и обнаружено, что аллель rs1570538*C является протективным в отношении развития РС [35].

Был исследован полиморфизм rs12722580, обусловленный делецией фрагмента длиной 73 п.о. в интроне 3 гена IL2RA. Данный локус практически не изучен, сведений об ассоциации его с РС или какими-либо другими заболеваниями в доступной литературе мы не обнаружили. Результаты анализа ассоциаций этого полиморфизма с РС у лиц русской этнической принадлежности, проживающих в РБ (276 больных РС, 342 представителя контрольной группы), продемонстрировали, что генотип D/D является маркером повышенного риска развития РС (OR=1,7, ДИ: 1,04—2,77, p=0,034), а гетерозиготный генотип, напротив, обладает протективным действием (OR=0,69, ДИ: 0,50—0,96, p=0,031). В исследуемой семье генотип rs12722580*D/D был обнаружен лишь у 1 из заболевших, как и генотип I/D; генотип I/I был идентифицирован у 3 членов семьи, включая пробанда. Таким образом, можно предполагать, что полиморфный вариант rs12722580 гена не является ключевым в определении наследственной предрасположенности к РС в данной семье.

IL2 играет важную роль в развитии иммунного ответа, контролируя процессы пролиферации и апоптоза Т- и В-лимфоцитов, естественных киллерных клеток и фагоцитов. IL2 обнаруживается в очагах демиелинизации головного мозга у больных РС [36]. Нами был изучен полиморфизм rs2069772, обусловленный заменой гуанина на аденин в 4518-й позиции (интрон 3) гена IL2. Данных об ассоциации этого локуса с РС нами не обнаружено; тем не менее было продемонстрировано наличие неравновесия по сцеплению (D’=1,00) между rs2069772 и rs2069762 (–330T>G), который расположен в промоторе гена IL2 и оказывает влияние на уровень продукции IL2 в лимфоцитах [37, 38]. В связи с этим было высказано предположение о возможности использования данного SNP в качестве маркера при изучении наследственной предрасположенности к различным заболеваниям, в патогенезе которых принимает участие IL2. В то же время, по данным J. Shi и соавт. [39], в популяциях европейского и азиатского происхождения наблюдается различие в структуре блоков сцепления в данном локусе (у европейцев определяется крупный блок, содержащий исследуемый ген, а у азиатов — более мелкие группы сцепления). В исследуемой семье у пробанда нами был идентифицирован генотип rs2069772*A/A, остальные члены семьи, страдавшие РС, были носителями гетерозиготного генотипа. При проведении анализа ассоциаций данного локуса с РС в трех этнических группах жителей РБ, нами не выявлено связи rs2069772 с развитием заболевания. Таким образом, результаты нашего исследования не позволяют отнести rs2069772 к информативным маркерам РС в изученных этнических группах; однако с учетом наличия в генетической структуре популяций Волго-Уральского региона как европейского, так и азиатского компонентов нельзя исключать возможность существования других полиморфных вариантов гена, ассоциированных с развитием заболевания.

Ген IL7R кодирует рецептор IL-7, который взаимодействует с гамма-субъединицей рецептора IL-2 и образует комплекс, связываясь с которым, IL-7 реализует свои биологические эффекты. IL-7 играет фундаментальную роль в созревании Т-лимфоцитов, Т-клеточном гомеостазе, а также развитии и поддержании иммунологической толерантности [40]. У европейцев и жителей США европейского происхождения была выявлена ассоциация с РС полиморфного локуса rs1494558, связанного с заменой T на C в экзоне 2 гена IL7R, приводящей к замещению изолейцина на треонин во внеклеточном домене белка IL7R. Найденная ассоциация, однако, не достигала уровня статистической значимости при введении поправки на множественные сравнения [41]. Данный SNP находится в тесном неравновесном сцеплении (D’=0,97) с полиморфизмом rs6897932, локализованным в области сайленсера сплайсинга в экзоне 6 гена IL7R, кодирующем мебранно-интегрированный домен рецептора IL-7 [40, 42]. Продемонстрировано, что аллель rs6897932*C связан с увеличением альтернативного сплайсинга и повышенной продукцией растворимой формы рецептора IL-7 [41]. Как следствие, у лиц с генотипом rs6897932*С/С отмечаются более высокие уровни циркулирующего IL-7R [41]. Результаты анализа ассоциаций полиморфизма rs1494558 гена с РС в популяции русских, проживающих в РБ, показали, что риск заболевания повышен у носителей генотипа T/T (OR=1,6, ДИ 1,05—2,43), а генотип C/C обладает протективным действием (OR=0,54, ДИ 0,38—0,77). У 4 членов исследуемой семьи обнаружен гетерозиготный генотип, у пробанда — генотип C/C. Протективное действие генотипа rs6897932*C/C может отчасти объяснять доброкачественное течение и отсутствие прогрессирования заболевания у пробанда.

Также нами был изучен полиморфизм rs10624573, связанный с инсерцией фрагмента AGAAG в интроне 1 гена IL7R. Все члены исследуемой семьи, страдающие РС, были носителями аллеля rs10624573*D; у 2, включая пробанда, определялся генотип rs10624573*D/D. Тем не менее, поскольку данный локус практически не изучен, сведения о его вкладе в развитие РС или каких-либо других заболеваний отсутствуют, сделать вывод о значении этого полиморфизма для развития заболевания в исследуемой семье не представляется возможным.

Полиморфизм rs1109670 локализован в межгенном пространстве, на расстоянии 250 тыс. п.о. от точки начала транскрипции гена мембраносвязанной доменсодержащей О-ацилтрасферазы 2 (также известной как лизофосфатидилхолин ацилтрансераза 4) — фермента, участвующего в синтезе компонентов клеточных мембран (фосфолипидов), и на расстоянии 100 тысяч п.о. от гена ASAP2, кодирующего белок, содержащий SH3-домен, анкириновый повтор и домен гомологии плекстрина. Этот белок присутствует в аппарате Гольджи, где он образует комплекс с тирозиновой протеинкиназой 2-бета и контролирует везикулярный транспорт. Ассоциация данного полиморфизма с РС впервые была обнаружена в полногеномном исследовании популяции европейцев, в котором приняли участие 978 пациентов с РС и 883 представителя контрольной группы [43]. Была предпринята попытка воспроизвести полученные результаты у жителей Австрии (883 больных РС и 336 лиц группы контроля), однако обнаруженная ассоциация не достигала уровня статистической значимости при введении поправки на множественное тестирование [44]. Аналогичная попытка репликации полученных результатов в испанской популяции (2863 пациента с РС, 2930 лиц группы контроля) также не увенчалась успехом [45]. Высказана гипотеза, что найденные ассоциации могут объясняться сцеплением с другим локусом, KIDINS220 (Kinase D-Interacting Substrate, 220 kDa), продукт которого предположительно участвует в развитии РС, оказывая влияние на развитие и регенерацию нервных клеток [46]. В изученной семье 4 из 5 членов, страдающих РС, являлись гомозиготами по аллелю rs1109670*C, 1 был гетерозиготным носителем данного аллеля.

Ассоциация полиморфизма rs9523762 гена GPC5 с РС была продемонстрирована в полногеномном исследовании популяции американцев (978 больных РС и 883 представителя группы контроля) и подтверждена затем в репликативных исследованиях в популяциях испанцев, афроамериканцев и корейцев [43, 45, 47]. Ген GPC5 кодирует глипикан 5 — белок, который входит в состав гепарансульфат протеогликана и экспрессируется на поверхности клеток головного мозга. Глипикан 5 взаимодействует с различными факторами роста, влияя на процессы развития и восстановления нейронов. Сообщается о других полиморфных локусах в составе гена GPC5, ассоциированных с РС [48]. Нами обнаружено, что все члены исследуемой семьи являются носителями аллеля rs9523762*G, причем у пробанда этот аллель присутствует в гомозиготной форме. Таким образом, наши данные согласуются с результатами других исследований, свидетельствующих, что аллель rs9523762*G связан с повышенным риском РС.

Выявлено носительство аллеля rs3129934*T у пробанда (VI-1) и всех его родственников, страдающих Р.С. Этот локус расположен вблизи области HLA класса II. Ассоциация аллеля rs3129934*T с РС была обнаружена в результате GWAS, проведенного в популяции испанцев, и затем воспроизведена у американцев, итальянцев, а также в смешанной выборке жителей США и Европы [43, 49, 50]. Кроме того, было показано, что rs3129934 находится в неравновесном сцеплении с rs3135388, который также ассоциирован с РС и в свою очередь тесно сцеплен с аллелем DRB1*1501 [51]. В связи с этим было высказано предположение, что rs3129934, как и rs3135388, выступает в роли tagSNP для DRB1*1501, и, таким образом, найденные ассоциации отражают функциональную значимость локуса HLA-DRB1 для развития РС [50]. Методом семейного анализа AFBAC (affected family-based control) выявлена ассоциация с РС аллеля HLA-DRB1*15 у русских, проживающих в Московской области [52]. Кроме того, полиморфизм rs3129934 сцеплен с rs9267992, аллель, А которого ассоциирован со снижением уровня экспрессии гена HLA-DQA1 [53]. Таким образом, ассоциация rs3129934 с РС, вероятно, обусловлена его сцеплением с локусами главного комплекса гистосовместимости, которые вовлечены в патогенез Р.С. То обстоятельство, что аллель T данного полиморфизма обнаруживается у всех членов исследуемой семьи, страдающих РС, дает основания полагать, что rs3129934 является информативным маркером заболевания у русских из РБ, но для подтверждения этой гипотезы необходимы дополнительные исследования.

Было проведено генотипирование по полиморфному маркеру rs2304256, связанному с заменой C на A в экзоне 8 гена TYK2, приводящей к замещению валина на фенилаланин в 362-й позиции аминокислотной последовательности белка тирозинкиназы 2, в домене, отвечающем за взаимодействие с рецептором 1 интерферона-альфа (IFNAR1). Полагают, что полиморфизм rs2304256 может оказывать влияние на функцию белка [54]. Согласно результатам GWAS часто встречающийся аллель C данного локуса ассоциирован с развитием системной красной волчанки и других аутоиммунных заболеваний [54, 55]. Также продемонстрировано, что аллель rs2304256*C входит в состав триплетного сочетания аллелей, которое встречается с повышенной частотой у пациентов с РС, не реагирующих на терапию (non-responders) интерфероном-бета [56]. Мы обнаружили, что все члены изученной семьи были носителями генотипа rs2304256*C/C. Необходимы дальнейшие исследования, чтобы оценить вклад данного полиморфизма в развитие РС и чувствительность к лекарственной терапии.

Результаты метаанализа данных 7 полногеномных исследований с участием представителей европейских популяций (5545 больных РС, 12 153 лица группы контроля) продемонстрировали наличие ассоциации аллеля rs2293152*G гена STAT3 с пониженным риском РС (OR=0,82, p=4,1·10^–8) [57]. Тем не менее в дальнейшем не удалось подтвердить найденную ассоциацию в независимой выборке [58]. Все члены исследуемой семьи, страдающие РС, были носителями аллеля rs2293152*G гена STAT3; у 3, в том числе пробанда, был обнаружен генотип rs2293152*G/G. Таким образом, требуется проведение дополнительного анализа функциональной роли данного полиморфизма в патогенезе РС.

В исследовании A. Karban и соавт. [59] было продемонстрировано, что аллель D полиморфизма rs28362491, связанный с делецией фрагмента ATTG в –94 позиции промотора гена NFKB1, ассоциирован со сниженной активностью промотора in vitro. Были найдены ассоциации rs28362491 с различными аутоиммунными заболеваниями (язвенный колит, системная красная волчанка и т. д.) [59, 60]. Тем не менее в единственном доступном на настоящий момент исследовании, посвященном анализу ассоциаций rs28362491 с РС в иранской популяции, связи данного локуса с развитием заболевания найдено не было [61]. Носительство аллеля rs28362491*D было обнаружено у всех членов исследуемой семьи, пораженных РС, однако отсутствие сведений о роли этого полиморфизма в развитии заболевания не позволяет судить о его вкладе в формирование наследственной предрасположенности к РС в этой семье.

При проведении иммуносупрессивной и иммуномодулирующей терапии РС возрастает риск развития злокачественных новообразований кроветворной системы [62, 63]. Продемонстрировано, что аллель C полиморфизма rs10974944 гена JAK2 ассоциирован с развитием миелопролиферативных новообразований [64]. Нами было установлено, что аллель rs10974944*G в гетерозиготном состоянии обнаруживается у 2 членов исследуемой семьи, 3 были гомозиготами по аллелю rs10974944*C. Дальнейшее изучение роли данного полиморфизма в популяциях РБ позволит оценить перспективы его применения для оценки безопасности лечения РС.

В изучаемой семье с несколькими случаями РС обнаружено накопление значимых аллелей генов-кандидатов РС: rs1109670*C гена ASAP2, rs9523762*G гена GPC5, rs10624573*D и rs1494558*I гена IL7R, rs2293152*G гена STAT3, rs1570538*Т и rs12722580*I гена IL2RA, rs2069772*А гена IL2. Полученные нами данные подтверждают предположение, что развитие семейных форм заболевания может быть обусловлено действием нескольких генетических вариантов, обладающих выраженным эффектом [65]. Необходимы дальнейшие исследования, включающие длительное наблюдение за пациентами с РС и их семьями, а также изучение молекулярно-генетических особенностей формирования семейных случаев РС в различных популяциях и этнических группах с целью определения прогностической значимости выявленных генетических маркеров для пациентов и их родственников. Анализ молекулярно-генетических особенностей семейных форм, возможно, станет еще одним шагом к пониманию патогенеза РС и прогнозированию индивидуального риска развития заболевания.

Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.