Эффективность реамберина в коррекции процессов перекисного окисления липидов в плазме крови больных раком яичников

Рак яичников, диагностируемый в основном в III—IV стадии заболевания, представляет актуальную проблему современной онкогинекологии [1—5]. Разработка патогенетически обоснованных методов ранней диагностики и лечения рака яичников остается приоритетной [6—11]. Злокачественные опухоли яичников чувствительны к полихимиотерапии (ПХТ), однако достаточно высокая токсичность химиопрепаратов, приводящая к развитию осложнений и синдрома эндогенной интоксикации, зачастую ограничивает возможности ПХТ [12—17]. Кроме того, доклиническими и клиническими исследованиями доказано, что в основе патогенеза рака яичников лежат активация свободнорадикального окисления, усиливающаяся при нарастании опухолевой массы, накопление продуктов перекисного окисления липидов (ПОЛ) на фоне истощения мощности антиоксидантной системы (АОС) [18—25]. В связи с вышеизложенным возникает необходимость разработки научно обоснованных подходов к проведению ПХТ рака яичников, основанных на использовании в схеме комплексного лечения препаратов, дающих многокомпонентный эффект, в том числе дезинтоксикационный, антиоксидантный, антигипоксантный. Данные свойства выявлены у препарата реамберин, созданного НТФФ ПОЛИСАН (Санкт-Петербург, Россия) на основе янтарной кислоты, включающего, помимо сукцината, электролиты (натрия, магния и калия хлорид) и сольстабилизирующий агент N-метилглюкамин.

Цель исследования — изучить влияние реамберина на интенсивность процессов ПОЛ и состояние АОС у больных раком яичников.

Материал и методы

Проведено проспективное контролируемое открытое рандомизированное исследование в соответствии с «Правилами проведения качественных клинических испытаний (GCP)» (ОСТ № 42−511−99 от 29.12.98) с положениями Хельсинкской декларации и руководства по надлежащей клинической практике, разработанной на Международной конференции по гармонизации технических требований к регистрации фармацевтических продуктов, предназначенных для человека (ICH-GCP — International Conference on Harmonisation of Technical Requirements for Human Use) и с разрешения этического комитета ФГБОУ ВО «Амурская ГМА» (протокол № 4 от 22.11.17).

В исследование включены 64 пациента. Критерии включения в исследование: женщины старше 18 лет; верифицированный процесс (доказанный морфологически); рак яичников III стадии по FIGO; отсутствие серьезных нарушений функции почек, печени и системы кроветворения; адекватные показатели деятельности сердечно-сосудистой и дыхательной систем; отсутствие первично-множественных, синхронных и метахронных злокачественных опухолей; добровольное информированное согласие. Критерии исключения из исследования: острые инфекции, в том числе гепатит В и С, ВИЧ; прогрессирование заболевания на фоне специального лечения, выявление по данным контрольного клинического обследования отдаленных метастазов; наличие неконтролируемого судорожного расстройства в анамнезе; предшествующая нейропатия любой этиологии более чем 1-й степени тяжести; клинически значимые неконтролируемые нарушения: инфаркт миокарда, инсульт или транзиторная ишемическая атака, психиатрическое заболевание/социальные обстоятельства, ограничивающие возможность пациента выполнять требования исследования.

Пациенты были разделены на две группы: пациенты контрольной (1-я) группы (30 человек) получали ПХТ с использованием препаратов платины: цисплатина, карбоплатина (цитостатические противоопухолевые химиотерапевтические лекарственные препараты алкилирующего типа, содержащие в составе молекул двухвалентную платину (II) и неформально называемые просто «платиной», являющиеся координационными комплексами двухвалентной платины) по схеме: карбоплатин AUC6−7 внутривенно (в/в) в 1-й день 21-дневного курса, или САР (цисплатин 50 мг/м² в/в, доксорубицин 50 мг/м² в/в, циклофосфан 500 мг/м² в/в в 1-й день 21-дневного курса); в экспериментальной (2-й) группе (34 человека) ПХТ дополнена внутривенным капельным введением препарата реамберин 1,5% раствор для инфузий ежедневно в течение 5 дней по 400 мл/сут со скоростью 40—80 капель (2—4 мл) в минуту.

Забор венозной крови в контрольной и экспериментальной группах пациентов осуществляли до лечения и на 5-е сутки лечения (в процессе ПХТ). Кровь собирали в охлажденные пробирки с гепарином, центрифугировали при 3000 об/мин в течение 15 мин, полученную плазму крови хранили при температуре –18 °С до момента исследования. Интенсивность процессов ПОЛ оценивали, исследуя содержание гидроперекисей липидов, диеновых конъюгатов, малонового диальдегида и компонентов АОС (церулоплазмина, витамина E) в плазме крови пациентов по методикам, изложенным в ранее опубликованных нами работах [11, 19]. В работе использовали приборы: спектрофотометр КФК-2 мп, спектрофотометр UNICO, фотоэлектроколориметр Solar PV 1251 C. Интегральный показатель — коэффициент баланса окислительно-антиокислительных процессов (К) рассчитывали по формуле:

К =[ (АО₁б/АО₁н).(АО₂б/АО₂н) ]–[ (О₁б/О₁н).(О₂б/О₂н).(О₃б/О₃н) ];

К = АО — О,

где б — исследуемый образец; н — среднее значение показателя в норме (в качестве нормальных показателей приняты их значения, полученные при обследовании 20 здоровых доноров).

Статистическую обработку результатов проводили с использованием критерия Стъюдента (t) с помощью программы Statistica v.6.0. Результаты считали достоверными при р<0,05.

Результаты и обсуждение

В результате проведенных исследований установлено, что применение химиопрепаратов способствует повышению интенсивности процессов пероксидации и накоплению продуктов ПОЛ в плазме крови пациентов контрольной группы (табл. 1, 2):

Таблица 1. Содержание первичных продуктов ПОЛ (в нмоль/мл) в плазме крови больных раком яичников III стадии по FIGO на фоне полихимиотерапии и введения реамберина (М±m) Примечание. Здесь и в табл. 2 и 3: * – достоверность различия показателей по сравнению с пациентами на I этапе исследования (до лечения) (р<0,05); ** — достоверность различия показателей по сравнению с пациентами, получавшими только полихимиотерапию (р<0,05).

Таблица 2. Содержание малонового диальдегида (в нмоль/мл) в плазме крови больных раком яичников III стадии по FIGO на фоне полихимиотерапии и введения реамберина (М±m)

на 5-е сутки исследования (II этап) содержание гидроперекисей липидов увеличилось на 19,2% относительно аналогичного показателя на I этапе исследования (р<0,05), диеновых конъюгатов — на 12,1%, малонового диальдегида — на 22,8% (р<0,05). Полученные данные согласуются с результатами исследований, проведенных учеными Ульяновского государственного университета, свидетельствующих о повышении уровня малонового диальдегида в плазме крови больных раком яичников III клинической стадии по FIGO через 3 сут после первого курса ПХТ по схеме САР и через 3 сут после второго курса [26]. На основании полученных данных этими же учеными в заключение высказано мнение о целесообразности использования дифференцированной многокомпонентной антиоксидантной терапии у больных раком яичников, что нашло подтверждение в результатах проведенного нами исследования: дополнение ПХТ реамберином препятствовало накоплению продуктов пероксидации в динамике от I ко II этапу исследования на 11,9% (гидроперекиси липидов), на 6,6% (диеновые конъюгаты), на 14,1% (малоновый диальдегид). Важно отметить, что содержание первичных и вторичного продуктов ПОЛ, практически идентичное на I этапе исследования (до лечения) в контрольной и экспериментальной группах пациентов, на II этапе в группе пациентов, получавших ПХТ с включением реамберина, было достоверно ниже на 26,5% (гидроперекиси липидов), на 16% (диеновые конъюгаты), на 30% (малоновый диальдегид) относительно аналогичных показателей в контрольной группе. Это в очередной раз свидетельствует об антиоксидантной активности сукцинатсодержащего препарата, связанной с наличием в составе прежде всего янтарной кислоты, антиокислительное действие которой доказано в доклинических и клинических исследованиях [27]. Кроме того, совокупность проведенных исследований, выполненных под руководством проф. В.Н. Анисимова (НИИ онкологии Минздрава России), позволяет предполагать, что соль янтарной кислоты, используемая в реамберине, может быть эффективным противоопухолевым средством, поскольку при введении препарата экспериментальным животным наблюдалось уменьшение частоты спонтанных опухолей, увеличение максимальной продолжительности жизни, снижение частоты развития новообразований, вследствие нормализующего влияния сукцината, во-первых, на энергетику митохондрий, пораженных патологическим процессом, во-вторых, на энергообеспечение центров нейроэндокринной системы (янтарная кислота способна снижать порог чувствительности гипоталамо-гипофизарной системы к гомеостатическим сигналам), участвующей в формировании возрастной патологии (связанной с повышением порога чувствительности гипоталамуса к гомеостатическим стимулам), включая возникновение опухолей. В пользу этого предположения свидетельствуют данные В.Н. Анисимова об аналогичном действии янтарной кислоты на продолжительность жизни и частоту спонтанных опухолей под влиянием дифенина, также обладающего свойством снижать порог чувствительности гипоталамуса к действию эстрогенов.

Способность реамберина препятствовать накоплению продуктов липопероксидации в плазме крови больных раком яичников на фоне ПХТ коррелирует с влиянием сукцинатсодержащего препарата на активность компонентов АОС, что нашло подтверждение в результатах проведенного исследования (табл. 3),

Таблица 3. Содержание компонентов АОС (в мкг/мл) в плазме крови больных раком яичников III стадии по FIGO на фоне полихимиотерапии и введения реамберина (М±m)

которые отразили повышение уровня церулоплазмина в динамике от I ко II этапу исследования у пациентов экспериментальной группы с включением реамберина на 16,6%, витамина E на 5,3% в сравнении с отрицательной динамикой в контрольной группе, где наблюдалось достоверное снижение активности основных компонентов АОС на 23,5 и 21,9% соответственно (р<0,05). Дополнение ПХТ реамберином способствовало достоверному увеличению содержания церулоплазмина относительно контроля на II этапе исследования на 67,8% (р<0,05), витамина Е на 13,3% (р<0,05). Полученные нами результаты исследований согласуются с оценкой в 2013 г. индийскими учеными эффективности применения антиоксидантов при цисплатининдуцированном окислительном повреждении у крыс, показавшей возможность снижения антиоксидантами побочных эффектов химиотерапии за счет увеличения экспрессии эндогенных антиоксидантов [28, 29].

Расчет коэффициента баланса окислительно-антиокислительных процессов в контрольной группе пациентов свидетельствовал о повышенной активности окислительных процессов (К=0,46±0,12), что подчеркивает целесообразность введения экзогенных антиоксидантов и согласуется с данными литературы [24, 25]. В свою очередь использование реамберина в эксперименте способствовало изменению соотношения в системе АОС/ПОЛ в сторону увеличения коэффициента К до 1,56±0,18, подтверждая антиоксидантные свойства препарата.

В целом подтверждена эффективность реамберина в коррекции процессов ПОЛ биомембран у больных раком яичников в III клинической стадии по FIGO на фоне ПХТ за счет комплексного воздействия лекарственного средства на клеточный метаболизм и степень опухолевой интоксикации, что дает основание рекомендовать реамберин к включению в комплексную терапию больных раком яичников.

Выводы

1. Химиотерапия по схеме САР у больных раком яичников III клинической стадии по FIGO повышает интенсивность процессов ПОЛ и индуцирует накопление продуктов пероксидации на фоне снижения активности основных компонентов АОС.

2. На фоне ПХТ внутривенное капельное введение реамберина 400 мл 1,5% раствора для инфузий 1 раз в сутки в течение 5 дней достоверно увеличивает активность АОС и снижает содержание продуктов ПОЛ в плазме крови больных раком яичников.

Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.

Сведения об авторах

Бондаренко Дмитрий Анатольевич — зам. гл. врача по лечебной работе, аспирант (заочная форма обучения) каф. госпитальной терапии с курсом фармакологии;