Тераностика — направление в лечении, сочетающее диагностику и терапевтическое воздействие. Применительно к лечению глиобластом (ГБ) тераностика решает задачи обнаружения и уничтожения опухолевых стволовых клеток (ОСК), устойчивых к лучевому и химиотерапевтическому воздействию и обусловливающих рецидивирование опухоли. В качестве потенциального маркера ОСК рассматривается трансмембранный поверхностный антиген CD133.

ЦЕЛЬ ИССЛЕДОВАНИЯ

Определить возможность детекции CD133 в клетках перевиваемых культур, полученных из образцов ГБ пациентов, с помощью флуоресцентной микроскопии при использовании модифицированных аптамеров (молекулярных узнающих элементов, МУзЭл) анти-CD133.

МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ

Для детекции CD133 использовали флуоресцентные моноклональные антитела анти-CD133 MA1-219 мыши, FAM-модифицированные ДНК-аптамеры анти-CD133 AP-1-M и Cs5, в качестве отрицательного контроля — неаптамерный ДНК-олигонуклеотид NADO. Детекцию проводили для трех образцов перевиваемых клеточных культур, полученных из постоперационных тканей ГБ пациентов, закодированных как 1548, 1721, 1793.

РЕЗУЛЬТАТЫ

Антитела MA1-219 наиболее ярко окрашивали культуру клеток 1548, в меньшей степени — 1721, и диффузно окрашивали клетки культуры 1793. Аптамер Cs5-FAM окрашивал клетки аналогичным образом, но гораздо слабее. Аптамер AP-1-M-FAM еще слабее взаимодействовал с клетками, диффузно окрашивая только культуру клеток 1793. Неаптамерный NADO не окрашивал культуру клеток 1548 и очень слабо диффузно окрашивал культуру клеток 1793.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Для обоих типов МУзЭлей — как антител MA1-219, так и аптамера Cs5, три образца культуры клеток можно расположить в следующем порядке, возможно, отражающем уменьшение статуса CD133: сильный сигнал для культуры клеток 1548, гораздо слабее — для 1721, еще слабее — для 1793. Только культура клеток 1548 может считаться CD133-положительной с комбинацией сигналов Cs5+ и NADO–. Культура клеток 1793 является CD133-ложноположительной с комбинацией сигналов Cs5+ и NADO+.