Введение
В последнее время все большее внимание исследователей привлекает значение кишечного микробиома, дисбактериоза и его влияние на организм в целом. Роль кишечного микробиома уже описана для широкого спектра заболеваний — от болезней центральной нервной системы до опухолевого роста [1]. Особым аспектом является изучение физиологии комменсальной грибковой популяции кишечного микробиома, качественные и количественные изменения которой наблюдаются наряду с изменениями состава бактерий. Малоизученными до сих пор являются патогенетические особенности влияния дисбактериоза кишечника на развитие заболеваний женской репродуктивной системы. В свою очередь, возникает сложный и неожиданный вопрос: имеется ли взаимосвязь между инфицированием перитонеальной жидкости, причиной которого может стать синдром повышенной кишечной проницаемости, и макрофагальной клеточной популяцией при эндометриозе?
Цель исследования — определить, имеется ли взаимосвязь между инфицированием перитонеальной жидкости и макрофагальной клеточной популяцией при эндометриоидных кистах яичников.
Материал и методы
В исследовании участвовали 23 пациентки, получавших лечение в гинекологических отделениях №2 и №3 ОГБУЗ «Клиническая больница скорой медицинской помощи» Смоленска (исследование одобрено решением этического комитета ФГБОУ ВО «Смоленский государственный медицинский университет» Минздрава России от 02 ноября 2020 г., протокол №2), с гистологически верифицированным диагнозом эндометриоидной кисты яичника (средний возраст 32,4 года, возрастной интервал 21—44 года). От каждой пациентки забирали следующий материал:
1) фрагмент ткани кисты яичника — для патологогистологического исследования (окраска гематоксилином и эозином) в отделении клинической патологии №2 им. проф. В.Г. Молоткова ОГБУЗ «Смоленский областной институт патологии»; также выполнено иммуногистохимическое исследование с использованием маркеров CD68, Ki-67 и p53;
2) перитонеальная жидкость — для микробиологического исследования, забор осуществляли интраоперационно в стерильных условиях при удалении эндометриоидной кисты яичника;
3) кал — для микробиологического исследования, забор осуществляли до оперативного вмешательства и назначения антибиотикотерапии.
Микробиологическое исследование материала, полученного от пациенток с гистологически верифицированном диагнозом эндометриоидной кисты яичника, проводили в лицензированной микробиологической лаборатории кафедры микробиологии ФГБОУ ВО «Смоленский государственный медицинский университет» Минздрава России. Материал доставляли в лабораторию не позднее 2 ч после взятия с соблюдением всех правил транспортировки. При исследовании материала использовали культуральный метод диагностики. Предварительное обогащение исследуемого материала проводили в сердечно-мозговом бульоне. Для выделения чистой культуры возбудителя использовали сердечно-мозговой кровяной агар, желточно-солевой агар, агар Макконки, селективный энтерококкагар, селективный агар для культивирования кокковой микрофлоры и анаэробный кровяной агар. Культивирование микроорганизмов проводили в условиях повышенного содержания СО2 и анаэробиоза. Для идентификации выделенной чистой культуры изучали ее морфологические, культуральные, биохимические свойства. Окончательную идентификацию видовой принадлежности микроорганизма осуществляли с помощью масс-спектрометрического анализа на масс-спектрометре с использованием программного обеспечения Maldi Biotyper 3.0 (Bryker Daltonics, Германия).
Все случаи на основании морфологической картины разделены на три группы (рис. 1): «молодые», «зрелые» и «старые» эндометриоидные кисты [1—3]. Для изучения гистотопографии клеточного микроокружения и пролиферативных процессов использовали поликлональные антитела к CD68 (Dako, США), Ki-67 (Ventana Medical Systems, США) и p53 (Dako, США). Иммуногистохимические реакции проводили в соответствии с протоколом производителя антител. В стенке эндометриодной кисты яичника при увеличении ×400 исследовали особенности клеточного микроокружения в пределах эндометриоидной выстилки (в собственной пластинке эндометриоидной выстилки и в пределах маточного эпителия) и клеточное микроокружение в пределах подлежащей фиброзной прослойки. Положительно окрашенные клетки подсчитывали в пределах трех гистологических структур: покровный (маточный) эпителий — зона 1; собственная пластинка слизистой оболочки эндометриоидной выстилки — зона 2 (отдельно в зоне 2 подсчитывали количество положительно окрашенных клеток в периваскулярных областях); подлежащая фиброзная прослойка — зона 3.
Рис. 1. Типы эндометриоидных кист яичника.
а — «молодая» эндометриоидная киста; б — «зрелая» эндометриоидная киста; в — «старая» эндометриоидная киста.
На основании результатов микробиологического исследования перитонеальной жидкости пациентки разделены на две группы: 1-я группа — с инфицированной перитонеальной жидкостью (11 пациенток); 2-я группа — со стерильной перитонеальной жидкостью (12 пациенток). Указанные группы сравнивали в отношении уровня экспрессии иммуногистохимических маркеров CD68, Ki-67 и p53 в пределах стенки эндометриоидной кисты.
Статистическая обработка исследуемых данных проведена в программе Statistica v. 10.0. Для поиска различий между несвязанными выборками использовали критерии Манна—Уитни (U) и хи-квадрат (χ2). Результаты считались статистически значимыми при уровне p≤0,05.
Результаты
В табл. 1 представлена характеристика микробного пейзажа перитонеальной жидкости и соответствующие микробиологические нарушения в кале, свидетельствующие о дисбактериозе кишечника; в табл. 2 приведены данные об обнаруженных в кале микроорганизмах у пациенток со стерильной перитонеальной жидкостью.
Таблица 1. Результаты микробиологического исследования перитонеальной жидкости и кала пациенток с эндометриоидными кистами яичников (с инфицированной перитонеальной жидкостью)
| Содержание микроорганизмов в перитонеальной жидкости | Содержание микроорганизмов в кале | Вид эндометриоидной кисты |
| Candida pseudotropicalis — 103 | Enterococcus faecalis — 106 (N 105—7) Мицелиальные грибы, Candida pseudotropicalis — 107 (N <104) ↑ Lactobacterium spp. — 107 (N 107—8) | «Молодая» |
| Pseudomonas aeruginosa — 102 Анаэробная микрофлора не обнаружена | Escherichia coli — 106 (N 107—8) ↓ Enterococcus faecalis — 103 (N 105—7) ↓ Lactobacterium spp. — 107 (N 107—8) Bifidumbacterium spp. — 1011 (N 109—10) ↑ | «Молодая» |
| Pseudomonas aeruginosa — 102 | Из представителей облигатной и факультативной микрофлоры кишечника только Bifidumbacterium spp. — 106 (N 109—10) ↓ | «Зрелая» |
| Enterococcus faecalis — 105 Pseudomonas aeruginosa — до 10 КОЕ | Escherichia coli — 107 ESBL– (N <105) ↑ Enterococcus gallinarum — 106—7 (N 105—8) Мицелиальные грибы — 106 (N <104) ↑ Lactobacterium spp. — 103—4 (N 107—8) ↓ | «Зрелая» |
| Enterococcus faecalis > 105 | Escherichia coli — 107 ESBL+ (N 107—8) Bifidumbacterium spp. — 1011 (N 109—10) ↑ | «Молодая» |
| Streptococcus parasanguinis >104 (монокультура) | Escherichia coli — 106 (N 107—8) ↓ Анаэробы: Bacteroides thetaiotaomicron, Bacteroides vulgatus, Bacteroides ovatus, Bacteroides eggerthii — 1010 (N 109—10) Clostridium innocuum — 1010 (N <105) ↑ Bifidumbacterium spp. — 109 (N 109—10) Lactobacterium spp. — 109 (N 107—8) ↑ Comomonas hirstersii — 105 Citrobacter freundii — 2×105 (N <104) ↑ | «Зрелая» |
| Candida pseudotropicalis — 102 | Мицелиальные грибы, Candida pseudotropicalis —106 (N <104) ↑ Lactobacterium spp. — 107 (N 107—8) Bifidumbacterium spp. — 109 (N 109—10) | «Зрелая» |
| Неспоробразующие анаэробы — 104 | Bifidumbacterium spp. — 104 (N 109—10)↓ Lactobacterium spp. — 102 (N 107—8) ↓ Escherichia coli — 107 ESBL– (N <105) ↑ | «Молодая» |
| Pseudomonas aeruginosa — 103 | Escherichia coli — 106 ESBL– (N <105) ↑ Мицелиальные грибы — 106 (N <104) ↑ Lactobacterium spp. — 103—4 (N 107—8) ↓ Bifidumbacterium spp. — 1011 (N 109—10) ↑ | «Зрелая» |
| Enterococcus faecalis > 104 | Enterococcus faecalis — 106 (N 105—7) Escherichia coli — 106 (N 107—8) ↓ Lactobacterium spp. — 105 (N 107—8) ↓ Bifidumbacterium spp. — 105 (N 109—10)↓ Мицелиальные грибы — 105 (N <104) ↑ | «Молодая» |
| Candida pseudotropicalis — 103 | Escherichia coli — 106 (N 107—8) ↓ Enterococcus faecalis — 103 (N 105—7) ↓ Lactobacterium spp. — 107 (N 107—8) Bifidumbacterium spp. — 1011 (N 109—10) ↑ Мицелиальные грибы, Candida pseudotropicalis — 106 (N <104) ↑ | «Молодая» |
Примечание. В табл. 1 и 2: N — нормальный уровень содержания микроорганизмов в кале.
Таблица 2. Результаты микробиологического исследования перитонеальной жидкости и кала пациенток с эндометриоидными кистами яичников (со стерильной перитонеальной жидкостью)
| Содержание микроорганизмов в перитонеальной жидкости | Содержание микроорганизмов в кале | Вид эндометриоидной кисты |
| Аэробной, факультативно-анаэробной микрофлоры нет | Escherichia coli — 106 (N 107—8) ↓ Micrococcus luteus — 107 Staphylococcus cohnii — 106 (N <104) ↑ Lactobacterium spp. — 105 (N 107—8) ↓ Bifidumbacterium spp. — 105 (N 109—10)↓ Мицелиальные грибы — 105 (N <104) ↑ | «Зрелая» |
| Аэробной, факультативно-анаэробной микрофлоры нет | Escherichia coli — 107 ESBL– (N <105) ↑ Bifidumbacterium spp. — 1011 (N 109—10) ↑ Lactobacterium spp. — не обнаружено (N 107—8) ↓ | «Зрелая» |
| Аэробной, факультативно-анаэробной микрофлоры нет | Enterococcus faecalis — 103 (N 105—7) ↓ Klebsiella oxytoca — 105 (N <104) ↑ Bifidumbacterium spp. — 104 (N 109—10)↓ | «Старая» |
| Аэробной, факультативно-анаэробной микрофлоры нет | Escherichia coli — 106 (N 107—8) ↓ Staphylococcus epidermidis — 103 (N <104) | «Старая» |
| Аэробной, факультативно-анаэробной микрофлоры нет | Escherichia coli — 105 (N 107—8) ↓ Staphylococcus cohnii — 103 (N <104) Bifidumbacterium spp. — 105 (N 109—10)↓ Lactobacterium spp. — 105 (N 107—8) ↓ | «Старая» |
| Аэробной, факультативно-анаэробной микрофлоры нет | Bifidumbacterium spp. — 109 (N 109—10) Lactobacillus gasseri — 107 (N 107—8) Enterococcus faecalis — 103 (N 105—7) ↓ Actinomyces urogenitalis — 107 | «Старая» |
| Аэробной, факультативно-анаэробной микрофлоры нет | Bifidumbacterium spp. — 104 (N 109—10)↓ Lactobacterium spp. — 104 (N 107—8) ↓ Escherichia coli — 106 (N 107—8) ↓ Citrobacter freundii — 105 (N <104) ↑ | «Зрелая» |
| Аэробной, факультативно-анаэробной микрофлоры нет | Escherichia coli — 106 (N 107—8) ↓ Bifidumbacterium spp. — 105 (N 109—10)↓ Lactobacterium spp. — 105 (N 107—8) ↓ | «Старая» |
| Аэробной, факультативно-анаэробной микрофлоры нет | Мицелиальные грибы — 104 (N <104) Escherichia coli — 106 (N 107—8) ↓ Staphylococcus cohnii — 106 (N <104) ↑ Lactobacterium spp. — 105 (N 107—8) ↓ Bifidumbacterium spp. — 105 (N 109—10)↓ | «Зрелая» |
| Аэробной, факультативно-анаэробной микрофлоры нет | Bifidumbacterium spp. — 1010 (N 109—10) Lactobacterium spp. — 107 (N 107—8) Enterococcus faecalis — 104 (N 105—7) ↓ | «Старая» |
| Аэробной, факультативно-анаэробной микрофлоры нет | Enterococcus faecalis — 104 (N 105—7) ↓ Bifidumbacterium spp. — 105 (N 109—10)↓ | «Старая» |
| Аэробной, факультативно-анаэробной микрофлоры нет | Escherichia coli — 106 (N 107—8) ↓ Lactobacterium spp. — 105 (N 107—8) ↓ Bifidumbacterium spp. — 105 (N 109—10)↓ Staphylococcus epidermidis — 102 (N <104) | «Старая» |
Обратим внимание, что микробиологические признаки дисбактериоза кишечника выявлены у 100% пациенток. Однако есть особенности микробиологического пейзажа кишечной микробиоты. Так, наиболее выраженные различия между группами определяются в отношении микотической флоры. На рис. 2 представлены наиболее часто встречающиеся представители кишечной микробиоты и их распределение относительно нормальных значений.
Рис. 2. Частота выявления микроорганизмов кишечной микробиоты у пациенток с инфицированной перитонеальной жидкостью.
Наиболее выраженные изменения состава кишечной микробиоты связаны с Enterococcus faecalis, Escherichia coli, а также мицелиальными грибами. Следует отметить, что в группе пациенток с инфицированной перитонеальной жидкостью мицелиальные грибы в кале присутствовали в 54,5% случаев, в количестве выше допустимого для нормального состава кишечной микрофлоры (<104). Несмотря на то что в перитонеальной жидкости в ряде случаев обнаружены Pseudomonas aeruginosa и Streptococcus parasanguinis, в кале данные микроорганизмы отсутствовали.
У пациенток со стерильной перитонеальной жидкостью при исследовании кала мицелиальные грибы высеяны лишь в 16,6% случаев, а их содержание не всегда превышало допустимое количество (<104) (рис. 3). Помимо этого, мицелиальные грибы обнаруживались только в кале пациенток со «зрелыми» эндометриоидными кистами яичника. Следует отметить, что группу с инфицированной перитонеальной жидкостью составили пациентки именно с «молодыми» и «зрелыми» эндометриоидными кистами, тогда как группу со стерильной перитонеальной жидкостью — пациентки со «старыми» эндометриоидными кистами яичников при полном отсутствии «молодых».
Рис. 3. Частота выявления микроорганизмов кишечной микробиоты у пациенток со стерильной перитонеальной жидкостью.
Количество позитивных в отношении CD68 и Ki-67 клеточных элементов было статистически значимо выше у пациенток с инфицированной перитонеальной жидкостью в пределах покровного эпителия (зона 1) (табл. 3).
Таблица 3. Сравнение количества клеток, позитивных в отношении маркеров Ki-67 и CD68, у пациенток с эндометриоидными кистами яичников с инфицированной и стерильной перитонеальной жидкостью (зона 1)
| Иммуногистохимические маркеры | Критерий Манна—Уитни, U Test; p<0,05 | |||
| сумма рангов | U | p | ||
| группа с инфицированной перитонеальной жидкостью | группа со стерильной перитонеальной жидкостью | |||
| CD68 | 28 550,5 | 5379,5 | 2964,5 | <0,0000 |
| Ki-67 | 28 557,0 | 5373,0 | 2958,0 | <0,0000 |
В пределах собственной пластинки слизистой оболочки эндометриоидной выстилки (зона 2) количество клеток, позитивных в отношении CD68 / CD68 (периваскулярная область) и Ki-67 (периваскулярная область), было статистически значимо выше у пациенток с инфицированной перитонеальной жидкостью (табл. 4).
Таблица 4. Сравнение количества клеток, позитивных в отношении ранее использованных иммуногистохимических маркеров, у пациенток с эндометриоидными кистами яичников с инфицированной и стерильной перитонеальной жидкостью (зона 2)
| Иммуногистохимические маркеры | Критерий Манна—Уитни, U Test; p<0,05 | |||
| сумма рангов | U | p | ||
| группа с инфицированной перитонеальной жидкостью | группа со стерильной перитонеальной жидкостью | |||
| CD68 | 26 306,0 | 7624,0 | 5209,0 | 0,0084 |
| CD68 (периваскулярная область) | 25 812,0 | 8118,0 | 5708,0 | 0,0041 |
| Ki-67 (периваскулярная область) | 25 899,5 | 8030,5 | 5615,5 | 0,0463 |
В подлежащей фиброзной прослойке (зона 3) у пациенток с инфицированной перитонеальной жидкостью выявлено статистически значимо большее количество клеток, позитивных в отношении CD68, Ki-67 (табл. 5).
Таблица 5. Сравнение экспрессии иммуногистохимических показателей у пациенток с эндометриоидными кистами яичников с инфицированной и стерильной перитонеальной жидкостью (зона 3)
| Иммуногистохимические маркеры | Критерий Манна—Уитни, U Test; p<0,05 | |||
| сумма рангов | U | p | ||
| группа с инфицированной перитонеальной жидкостью | группа со стерильной перитонеальной жидкостью | |||
| CD68 | 22 319,0 | 11611,0 | 3983,0 | <0,0000 |
| Ki-67 | 21 059,5 | 12870,5 | 2723,5 | <0,0000 |
Обсуждение
Особенности экспрессии CD68 и Ki-67 в эндометриоидных кистах яичников в зависимости от инфицирования перитонеальной жидкости
Макрофагальному клеточному центру управления гомеостазом эндометриоидной гетеротопии отводится важная роль в патогенезе эндометриоза [2—4]. Во всех исследуемых зонах количество CD68-позитивных клеточных элементов (макрофагов) статистически значимо выше у пациенток с инфицированной перитонеальной жидкостью по сравнению с пациентками, у которых перитонеальная жидкость не имела микробного обсеменения, в том числе в периваскулярной области собственной пластинки слизистой оболочки эндометриоидной выстилки. Немаловажным является тот факт, что группу с инфицированной перитонеальной жидкостью составили пациентки именно с «молодыми» и «зрелыми» эндометриоидными кистами, тогда как группу со стерильной перитонеальной жидкостью — пациентки со «старыми» эндометриоидными кистами яичников.
Что касается количества Ki-67-позитивных клеток, то во всех зонах стенки эндометриоидных кист экспрессия его также была статистически значимо выше у пациенток с инфицированной перитонеальной жидкостью. Полученные данные указывают на более активную пролиферативную активность эндометриоидной гетеротопии в присутствии микроорганизмов в перитонеальной жидкости. Как замечено ранее, пролиферативная активность напрямую зависит от функционального состояния противовоспалительной субпопуляции макрофагов (М2), которые в большом количестве инфильтрируют ткани эндометриоидной гетеротопии. Таким образом, инфицирование перитонеальной жидкости способствует поддержанию эндометриоидной кисты яичника в наиболее оптимальном функциональном состоянии на этапе «молодой» и «зрелой» эндометриоидной кисты. Полученные данные свидетельствуют в пользу того, что при эндометриозе существует некая патогенетическая связь между инфицированием перитонеальной жидкости, причиной которого, вероятно, является синдром повышенной кишечной проницаемости, и макрофагальным клеточным центром управления гомеостазом эндометриоидной гетеротопии. Таким образом, наличие микроорганизмов в перитонеальной жидкости может способствовать становлению альтернативной формы гомеостаза за счет перестройки макрофагального звена перитонеальной жидкости и формированию эндометриоидной гетеротопии на фоне маточно-перитонеального рефлюкса.
Связь синдрома повышенной кишечной проницаемости с нарушением комменсального микотического звена кишечного микробиома
Исходя из полученных нами данных, наиболее частым микроорганизмом, обнаруживаемым в перитонеальной жидкости у пациенток с эндометриоидными кистами яичников, является Candida pseudotropicalis (kefyr), что, наиболее вероятно, связано с дисбиозом толстой кишки и развитием синдрома повышенной кишечной проницаемости, так как у всех пациенток C. pseudotropicalis (kefyr) также обнаружен в большом количестве и в кале (до 107). Помимо этого, наличие синдрома повышенной кишечной проницаемости доказывает и обнаружение в перитонеальной жидкости E. faecalis.
L. Basmaciyan и соавт. выяснили, что при дисбиозе кишечника с преобладанием роста грибов рода Candida может наблюдаться нарушение целостности поверхностного эпителия его слизистой оболочки [5]. Прогрессирование данного состояния приводит к деградации Е-кадгерина с последующим повышением проницаемости стенки кишки [6]. По мнению авторов, при снижении резистентности организма распространение представителей рода Candida (например, C. albicans) наблюдается преимущественно из кишечника [5], а при хронических воспалительных заболеваниях кишечника достаточно часто наблюдается нарушение комменсальной грибковой популяции кишечного микробиома, что обычно сопровождается развитием синдрома повышенной кишечной проницаемости [7—11]. Прямым доказательством наличия синдрома повышенной кишечной проницаемости при эндометриозе в данном исследовании является обнаружение микроорганизмов в перитонеальной жидкости, среди которых преобладали C. pseudotropicalis (kefyr), P. aeruginosa и E. faecalis, при наличии признаков дисбиоза кишечника. Проникновение условно-патогенных микроорганизмов в перитонеальную жидкость, несомненно, оказывает влияние на ее гомеостаз и, вероятно, со временем достигает определенного баланса за счет взаимодействия между микроорганизмами и иммунокомпетентными клетками.
В монографии О.К. Хмельницкого и Н.М. Хмельницкой (2005) [12] авторы описывают варианты иммуноморфологических реакций при микотических поражениях, вот некоторые из них: 1) внутриклеточный паразитизм в клетках системы мононуклеарных фагоцитов без выраженной воспалительной реакции; 2) хроническое воспаление с преобладанием лимфоцитов и плазматических клеток и тенденцией к фиброзу.
Обратим внимание на то, что приведенные формы иммунного ответа на микотическое поражение тесно связаны с системой мононуклеарных фагоцитов. Вероятно, взаимодействие комменсальной грибковой популяции кишечного микробиома и макрофагов в перитонеальной жидкости создает благоприятные условия для формирования эндометриоидной гетеротопии.
Влияние внутримакрофагального паразитирования некоторых патогенов на становление альтернативной формы гомеостаза за счет перестройки макрофагального звена перитонеальной жидкости
Наряду с инфицированием перитонеальной жидкости C. pseudotropicalis (kefyr) у пациенток с эндометриоидными кистами яичников в ряде случаев обнаружены и другие микроорганизмы — P. aeruginosa, S. parasanguinis, а также некоторые неспоробразующие анаэробы. На сегодняшний день работы на тему патогенетического влияния указанных бактериальных агентов на становление эндометриоидной гетеротопии в современной литературе отсутствуют. Однако есть один неочевидный признак, который может объединять перечисленных микробных агентов — способность к внутриклеточному паразитизму в макрофагах.
P. aeruginosa считается исключительно внеклеточным патогеном, однако все больше данных указывает на то, что данный возбудитель встречается и внутриклеточно в макрофагах. В одном из исследований показана возможность внутримакрофагального существования штамма P. aeruginosa PAO1 дикого типа [13]. Обнаружены такие факторы вирулентности, как MgtC и OprF, необходимые для выживания P. aeruginosa в макрофагах за счет способности ускользать из фагосомы. На примере отопатогенного штамма P. aeruginosa было выяснено, что данный микроорганизм способен не только проникать в макрофаги, но и размножаться в них. Подобное взаимодействие «хозяин — патоген» возможно за счет экспрессии фактора OprF, что позволяет P. aeruginosa существовать в пределах мембраносвязанных везикул внутри макрофагов [14]. Помимо этого, фактор вирулентности MgtC важен для размножения внутри макрофагов и типичен как для Salmonella enterica и Mycobacterium tuberculosis, так и для некоторых штаммов P. aeruginosa. Важно отметить, что оптимальная экспрессия гена mgtC индуцируется именно внутри макрофагов, чему способствует закисление фагосом [15]. Что же касается S. parasanguinis, то в одной из работ показана возможность его выживания внутри фагоцитов за счет экспрессии адгезина FimA, что обеспечивает защиту патогена против окислительного стресса и характерно для его дикого типа [16].
Вопрос о потенциальной роли кишечной микробиоты в патогенезе эндометриоза возник совсем недавно, а результаты предшествующих исследований зарубежных авторов (S.B. Chadchan и соавт.) весьма многообещающие [17]. В эксперименте на мышиной модели хирургически индуцированного эндометриоза в группе с использованием антибиотиков широкого спектра действия (ванкомицин, неомицин, метронидазол и ампициллин) эндометриоидные поражения были значительно меньше. Помимо этого, интенсивность воспалительной реакции (исследована при помощи ряда маркеров — макрофагального маркера Iba1 в очагах поражения и IL-1β, TNF-α, IL-6 и TGF-β1 в перитонеальной жидкости) была значительно ниже у мышей, получавших антибиотики широкого спектра действия. Интересно, что введение кишечной микрофлоры мышей с эндометриозом восстанавливало рост эндометриоидных гетеротопий и усугубляло воспалительную реакцию.
Таким образом, некоторые патогены обладают механизмом устойчивости к макрофагам и, как следствие, адаптации к иммунному ответу хозяина. Длительное существование подобной системы «хозяин — патоген» может неблагоприятно сказываться на адекватной работе иммунного ответа, а именно на системе мононуклеарных фагоцитов. Подобный механизм может быть ключевым аспектом в становлении альтернативной формы гомеостаза за счет перестройки макрофагального звена перитонеальной жидкости, что способствует формированию эндометриоидной гетеротопии. Наиболее вероятно, что имеет значение не конкретный микроорганизм, находящийся в перитонеальной жидкости, а возможность его внутримакрофагального паразитирования с последующим влиянием на систему мононуклеарных фагоцитов.
На основании полученных данных можно предположить, что эндометриоз является следствием маточно-перитонеального рефлюкса на фоне изменения гомеостаза перитонеальной жидкости за счет перестройки макрофагального звена, возникшей вследствие развития синдрома повышенной кишечной проницаемости с последующим инфицированием перитонеальной жидкости.
Один из ключевых моментов — это становление патогенетической связи между инфицированием перитонеальной жидкости ввиду наличия синдрома повышенной кишечной проницаемости и макрофагальным клеточным центром управления гомеостазом эндометриоидной гетеротопии. Значительно более высокая выраженность уровня экспрессии иммуногистохимических маркеров CD68 и Ki-67 в стенке эндометриоидной кисты яичника на фоне инфицирования перитонеальной жидкости свидетельствует о том, что микроорганизмы в пределах перитонеальной жидкости влияют на систему мононуклеарных фагоцитов, что способствует функционированию эндометриоидной кисты яичника и более длительному ее сохранению на уровне «молодой» и «зрелой» эндометриоидной кисты. При отсутствии микроорганизмов в перитонеальной жидкости происходит сбой альтернативной формы гомеостаза, что способствует «старению» эндометриоидной кисты яичника и, вероятнее всего, в последующем приведет к ее склерозированию.
Заключение
Полученные нами пилотные данные дают право говорить о наличии связи этиопатогенеза эндометриоза с синдромом повышенной кишечной проницаемости и служат основанием для дальнейших, более детальных исследований. Исходя из полученных результатов, можно заключить, что имеет значение не конкретный микроорганизм, находящийся в перитонеальной жидкости, а возможность его внутримакрофагального паразитирования с последующим влиянием на систему мононуклеарных фагоцитов. Таким образом, своевременное выявление и лечение дисбактериоза кишечника и синдрома повышенной кишечной проницаемости может стать стратегией профилактики сбоя в работе системы мононуклеарных фагоцитов и формирования эндометриоидных гетеротопий.
Участие авторов:
Концепция и дизайн исследования — Украинец Р.В., Корнева Ю.С.
Сбор и обработка материала — Украинец Р.В., Доронина Н.В., Шистерова О.А., Моисеенкова М.И., Аленина Г.Н., О.В. Азовскова,
Статистическая обработка — Корнева Ю.С.
Написание текста — Украинец Р.В.
Редактирование — Корнева Ю.С.
Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.