Роль акушерской и экстрагенитальной патологии в структуре перинатальной заболеваемости и смертности велика. Высокая заболеваемость рождающихся в современной России детей является неизбежным следствием низкого уровня здоровья беременных, причем тенденции заболеваемости новорожденных вполне закономерно соответствуют темпам изменения уровня патологии матери. Наличие хронической патологии у женщин, неблагоприятное течение беременности, родов создают порочный круг (замкнутый цикл): «больные родители — больной плод — больной ребенок — больной подросток», длительность такого цикла составляет 20—25 лет, а с каждым новым циклом патологическая пораженность новорожденных и всей детской популяции возрастает [3, 14].

Аутизм, или расстройства аутистического спектра (РАС) — сложное дезинтегративное нарушение развития, характеризующееся выраженным дефицитом социального взаимодействия и коммуникации, ограниченными интересами и повторяющимися паттернами стереотипного поведения [12, 22]. РАС характеризуются генетическим полиморфизмом и фенотипической гетерогенностью [7], включающей нарушения не только со стороны ЦНС, но и различную соматическую патологию [12]. По данным Всемирной организации аутизма (ВОА), за последние 10 лет количество детей с аутизмом возросло в 10 раз [15, 19]. ВОА утверждает, что в Китае насчитывается не менее 1 100 000 случаев аутизма, в Соединенном Королевстве — 650 000, на Филиппинах — 500 000, а в Таиланде — не менее 180 000. При этом уровень распространения аутизма во всем мире возрастает на 14% каждый год [16, 19]. В Китае темпы роста количества случаев аутизма немного выше и составляют около 20% в год [16]. Частота рождения детей, страдающих этим расстройством, сегодня составляет один случай на каждые 60—80 новорожденных [17, 19].

Принято считать, что в 6—15% наблюдений аутизм непосредственно связан с генными дефектами, тогда как в 85—95% случаев причинами РАС являются эпигенетические факторы [24, 26]. В настоящее время РАС активно изучаются в биологическом аспекте [5, 13, 18]. Исследования последних 20 лет показали вовлеченность в патогенез аутизма иммуновоспалительных механизмов, включающих активацию врожденного и приобретенного иммунитета, а также токсические влияния среды, оксидативный стресс и митохондриальные дисфункции [2, 6, 12].

Таким образом, большинство случаев аутизма возникает лишь под влиянием определенных эпигенетических факторов. Эпигенетический аутизм следует рассматривать как группу врожденных мультисистемных заболеваний, не ограничивающихся нарушениями некоторых функций нервной системы: изменения у таких детей наблюдаются со стороны разных органов и систем, включая органы пищеварительной системы, эндокринной системы, тазовые органы и др. [10, 12, 24].

Ранее формирование раннего детского аутизма многие авторы [11, 20, 22, 25] связывали с нарушением симбиоза между матерью и плодом, расстройством адаптационных механизмов незрелого организма, со слабостью интеграционных процессов в нервной системе ребенка, а также с влиянием внешних факторов, таких как роды, перенесенные инфекции и травмы, и отстаивали многофакторность патогенеза РАС. Это согласуется с позднейшими наблюдениями. Так, обязательным условием формирования РАС являются некоторые события, приходящиеся на первую половину беременности. Сегодня можно предположить следующую последовательность событий: хроническое влияние инфекционных антигенов и/или токсичных химических агентов на организм женщины — индукция стойких иммунных нарушений, ведущих к изменениям продукции ряда аутоантител (ауто-АТ) класса IgG и провоспалительных цитокинов, — наступление беременности — нарушение процессов онтогенетического формирования и созревания структур головного мозга и ряда других органов, систем плода (А.Б. Полетаев и соавт., 2014). Соответственно, идентификация конкретных маркерных ауто-АТ, изменения которых лежат в основе и/или сопровождают формирование РАС, является задачей, важной для прогноза развития беременности в каждом индивидуальном случае. Попутно отметим, что иммунные механизмы матери принимают непосредственное участие в подготовке и обеспечении эмбрио- и фетогенеза (А.Б. Полетаев, 2008).

Основываясь на сообщениях о возможном сходстве в изменениях продукции и сывороточного содержания многих ауто-АТ у матерей и у их детей с РАС, в настоящей работе была проанализирована частота выявления аномальных профилей сывороточной иммунореактивности у матерей, родивших детей с РАС.

Пациенты. Обследованы 50 пациенток, в возрасте 25—35 лет (средний возраст 30,0±1,5 года), родивших детей с РАС и 32 ребенка (25 мальчиков и 7 девочек) в возрасте от 1 года до 3 лет с диагностированным РАС и характерной клинической симптоматикой.

Анализ данных соматического и гинекологического анамнеза женщин показал высокую частоту экстрагенитальных заболеваний, касающихся органов желудочно-кишечного тракта (ЖКТ) — 44% (n=22), эндокринной системы (заболевания щитовидной железы) — 28% (n=14), нарушения свертывающей системы крови (тромбоцитопатии) — 12% (n=6). Хронический эндометрит был выявлен у 12% (n=6) обследованных женщин, сальпингоофорит — у 14% (n=7).

Особый интерес представлял ретроспективный анализ течения предыдущей беременности и родов. Наиболее частым осложнением в I триместре были токсикоз и угроза прерывания беременности — 60% (n=30), затем умеренная и тяжелая преэклампсия — у 40% (n=20) беременных, далее угроза преждевременных родов — 16% (n=8). В 20% (n=10) наблюдений роды были преждевременными и в 80% (n=40) — своевременными. Все рожденные дети имели оценку по шкале Апгар на 8—9 баллов.

Иммунохимические исследования. Для исследования использовали свежеполученные образцы сыворотки крови, хранившиеся не более 2 сут при температуре 1—4 °С.

Иммунохимический анализ проводили с помощью метода ЭЛИ-Висцеро-Тест («молекулярная диспансеризация»), используя одноименные тест-наборы (производства компании «Иммункулус», Москва, Россия). Постановки иммуноферментных реакций выполняли как описано ранее (А.Б. Полетаев, 2010, 2013). При этом в образцах сыворотки крови выявляли и анализировали индивидуальные профили сывороточной иммунореактивности, зависящие от аномалий в относительном содержании ауто-АТ класса IgG, направленных к следующим 24 антигенам (ЭЛИ-Висцеро-Тест): ds-DNA, β2-GP I, Fc-Ig, Collagen, CoM-02, β1-АR, TrM-03, АNCA, KiM-S, LuM-S, GaM-02, ItM-07, ScM, HeS-08, HMMP, Insulin, Ins-R, ТG, TSH-R, AdrM-D/C, Spr-06, S100, GFAP, MBP (табл. 1). Постановку реакций каждой пробы сыворотки с каждым из антигенов проводили на одном и том же 96-луночном планшете. На каждом планшете проводились постановки и реакции контрольной сыворотки (КС) с каждым из антигенов. Все постановки реакций дублировали. Использовали стандартные процедуры твердофазного иммуноферментного анализа. Уровень оптической плотности реакции КС с каждым из антигенов принимались за 100%, а интенсивность реакции сыворотки пациентов с теми же антигенами рассчитывали по отношению к реакции КС (А.Б. Полетаев, 2013). Затем рассчитывали среднюю индивидуальную иммунореактивность исследуемых образцов сыворотки крови с каждым из антигенов в сравнении с реакцией КС по формулам:

R (ag1)¡100R (ag2)¡100

СИР=(– 100 + – 100 +…+

R (k1)R (k2)

R (agN)¡100

+–100):N,

R (kN)

где СИР — средняя индивидуальная иммунореактивность сыворотки индивидуального пациента по отношению ко всем используемым антигенам, выраженная в процентах от средней иммунореактивности контрольной сыворотки с теми же антигенами; R (ag1, 2,…N) — реактивность (в единицах оптической плотности) сыворотки обследуемого пациента с антигенами 1, 2,…N; R (k1, k2, …N) — реактивность (в единицах оптической плотности) контрольной сыворотки с антигенами 1, 2,…N.

Для построения профилей иммунореактивности рассчитывали отклонение (в % от индивидуального среднего нормализованного уровня реакции) сыворотки обследуемого пациента с каждым из используемых антигенов, используя формулы:

OD (ag1)¡100

R (nrm) ag1 = –100 –СИР

OD (k1)

OD (ag2)¡100

R (nrm) ag2 = –100 –СИР

OD (k2)

……………….

OD (agN)¡100

R (nrm) agN = –100 –СИР

OD (kN)

где R (nrm) ag1, ag2, … agN — отклонение (в % от индивидуального среднего нормализованного уровня реакции) сыворотки обследуемого пациента с каждым из используемых антигенов 1, 2,…N; OD (ag1, ag2, … agN) — оптическая плотность реакции сыворотки индивидуального пациента с каждым из используемых антигенов 1, 2,…N; OD (k1, k2…. к N) — оптическая плотность реакции контрольной сыворотки с каждым из используемых антигенов 1, 2,…N.

Примечание. При выполнении исследований ЭЛИ-Висцеро-Тест величина N составляла 24 (по числу антигенов тест-набора).

Пики сывороточной иммунореактивности: избирательные сдвиги относительной иммунореактивности с теми или иными антигенами выше 10% или ниже 20% от индивидуального среднего уровня рассматривали как аномальные пики, указывающие на имеющиеся или формирующиеся нарушения.

Для расчетов использовали специализированную компьютерную программу, поставляемую вместе с наборами. Статистический анализ полученных результатов проводился с использованием методов непараметрической статистики (критерий U Уилкоксона—Манна—Уитни).

При анализе результатов исследования ЭЛИ-Висцеро-Теста обращает на себя внимание то, что во всех анализированных пробах сыворотки, полученной от матерей и их детей с РАС, выявились сходства аномалий профилей иммунореактивности (почти у 64% матерей и их детей).

Чаще всего в профилях иммунореактивности матерей выявлялись аномалии, ассоциированные с ауто-АТ к β₂-GPI (в 42% наблюдений), в то время как у детей-аутистов были наиболее характерными пики ауто-АТ к dsDNA (в 31% наблюдений), что свидетельствует о стойком нарушении иммунной системы в обеих обследуемых группах. Также часто у матерей были отмечены аномалии иммунореактивности, ассоциированные с ауто-АТ к TrM-03 (в 44% наблюдений); высокий уровень таких АТ сопровождается нарушениями свертываемости крови по типу гиперкоагуляции (при избыточной агрегации тромбоцитов без их лизиса) или гипокоагуляции и тромбоцитопенией (при избыточном лизисе тромбоцитов); у детей часто отмечали пики ауто-АТ к CoM-02 (в 37% наблюдений). Аномалии иммунореактивности, ассоциированные с ауто-АТ к антигенам стенок ЖКТ: к антигенам толстой кишки (ScM) у матерей (в 30% наблюдений) и к антигенам желудка (GaM-02) и тонкой кишки (ItM-07) у детей-аутистов (соответственно в 34 и 46% наблюдений). Также при оценке профилей сывороточной иммунореактивности у матерей часто отмечались изменения ауто-АТ к антигенам щитовидной железы TG (42%) и TSH-R (38%), а у детей — к ауто-АТ к инсулину (37%), что заставляет предполагать о нарушениях эндокринной системы в обеих группах. Следует отметить, что у 44% матерей были выявлены аномалии иммунореактивности, ассоциированные с ауто-АТ к Spr-06 (является индикатором эндометрита и воспалительных процессов в других органах малого таза). Менее часто встречались пики иммунореактивности, ассоциированные с ауто-АТ к антигенам почек KiM-S и легких LuM-S. Характерно, что у более чем половины матерей (64%) и у 90% детей с аутизмом отмечались аномалии индивидуальной активности иммунной системы в виде выраженной иммуносупрессии (иммунодефицита) или генерализованной иммуноактивации (табл. 2).

Результаты выполненного исследования очередной раз подтверждают феномен «материнского импринтинга» [10], который играет одну из главенствующих ролей в формировании аутизма еще во внутриутробном периоде.

Избыток сывороточного содержания определяемых ауто-АТ у женщин сопровождается эмбриотоксическими эффектами и приводит к патологическому течению беременности. Частой причиной самопроизвольных выкидышей и развития преэклампсии (80—85% от всех наблюдений) является поликлональная иммуносупрессия. Детали патогенеза нарушений гестации отчасти обусловливаются участием естественных ауто-АТ в клиренсе организма беременной женщины и плода от продуктов катаболизма. Снижение продукции АТ-«мусорщиков» будет вести к снижению эффективности клиренса и сопровождаться избыточным накоплением токсичных метаболитов в организме, что может привести к хронической, постепенно нарастающей интоксикации, особенно негативно сказывающейся на незрелом организме плода [9]. Непосредственной причиной поликлональной иммуносупрессии, как правило (более чем в 90% наблюдений), является длительно существующие в организме женщины представители условно-патогенной внутриклеточной флоры вирусной и/или бактериальной природы.

Выявляемые изменения служат прогностическими маркерами существенного повышения риска разного рода осложнений гестационного процесса (нарушения формирования и функционирования фетоплацентарного комплекса, нарушения нормального развития эмбриона и плода и др.).

Материнский иммунный импринтинг принадлежит к важнейшим факторам, определяющим состояние здоровья будущего ребенка [4, 21]. Поэтому учет аномалий иммунного статуса беременной женщины, которые могут быть стойко фиксированы иммунной системой ее ребенка, важен для оценки рисков развития соматических, эндокринных и неврологических изменений у ребенка в первые месяцы и годы жизни [8].

Иммунная система матери играет важную роль в патогенезе внутриутробного формирования аутизма, а некоторые ауто-АТ женщин, планирующих беременность, могут использоваться в качестве молекул-маркеров в риске рождения ребенка с аутизмом. Можно надеяться, что разработка специализированных иммунохимических методов анализа таких маркеров уже в скором времени будет являться важной задачей в организации широкого иммунохимического скрининга женщин, планирующих беременность, для их выявления и коррекции еще до наступления беременности. Данный метод мог бы оказаться эффективным для предотвращения (снижения частоты) рождения детей, страдающих аутизмом.

Конфликт интересов отсутствует.